MBD1/mdr1信号转录调控胰腺癌多药耐药性的实验研究及其临床意义

摘要

本文对MBD1/mdr1信号转录调控胰腺癌多药耐药性及其临床意义进行了探讨。本研究利用RNA干扰技术，设计合成了针对MBDl基因的siRRAs，成功构建MBDlsiRNAs真核表达质粒RotroSuper-MBDl$iRNAs，并成功载入质粒．采用脂质体介导的方法将MBDl$iRNAs表达质粒转染胰腺癌细胞系BxPC-3，成功下调了BxPC-3细胞株MBD1基因表达水平。应用免疫组化定量分析法、FQ-PCR技术、MSP方法及MTT比色法检测BxPC-3细胞在调控前后mdr1/P-gP在蛋白水平、基因表达水平、基因甲基化程度以及肿瘤细胞增殖能力变化。结果表明：胰腺癌中P-gp与mdr1 mKNA表达呈显著一致，与mdr1基因转录区域结合位点甲基化表达程度也呈显著相关；当胰腺癌细胞株BxPC-3通过脂质体介导方法转染MBDlsiRNAs表达质粒后，M BD1的表达受到有效抑制，改变了mdr1/P-gP在蛋白水平、mRNA水平和基因甲基化的表达，影响了肿瘤细胞对药物的耐药能力，间接调控了胰腺癌的多药耐药性；外周血与肿瘤组织细胞中mdr1基因及其甲基化表达存在相关性及一致性。

目录

声明

前 言

第一部分 胰腺癌多药耐药基因mdr1及其转录区域结合位点甲基化的测定及其意义

材料和方法

结果

讨论

小结

第二部分 MBD1siRNA调控胰腺癌细胞株BxPC-3多药耐药性的实验研究

材料和方法

结果

讨论

小结

第三部分 外周血测定胰腺癌多药耐药基因及其甲基化水平的临床意义

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

胰腺癌和肿瘤多药耐药（文献综述）

胰腺癌外周血mdr1及其转录区域结合位点甲基化的检测和临床意义

致谢