转染VEGF基因骨髓间充质干细胞移植改善心肌梗死后心脏重构

摘要

本研究观察构建的血管内皮细胞生长因子基因腺病毒转染人骨髓间充质干细胞后的表达，观察血管内皮细胞生长因子基因转染的诱导人骨髓间充质干细胞植入梗死心肌后对心脏重构的影响，为骨髓间充质干细胞转染基因治疗缺血性心脏病提供实验依据。 笔者实验室成功构建了hVEGF165腺病毒表达载体。利用包装细胞HEK293扩增hVEGF165腺病毒；用PCR法鉴定扩增的腺病毒；用终点稀释分析方法测定扩增后腺病毒滴度。用密度梯度离心法分离大鼠骨髓间充质干细胞，体外培养、5-氮胞苷诱导，用相差显微镜、电子显微镜、免疫细胞化学方法和流式细胞仪等对诱导细胞进行鉴定。 结论为构建的hVEGF165腺病毒可在体外高效扩增；骨髓间充质干细胞可在体外诱导分化为肌源性细胞；转染hVEGF165腺病毒的骨髓间充质干细胞在体外生长良好，高效表达VEGF；转染hVEGF165腺病毒的骨髓间充质干细胞在心肌内存活，并分化为肌源性细胞，梗死区新生血管形成增加，心脏胶原、基质金属蛋白酶合成降低，心脏重构减轻，心功能改善。转染hVEGF165腺病毒的骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死是有效、安全的。

目录

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摘要

英文缩略语

前言

第一部分hVEGF165重组腺病毒的表达和扩增

材料

方法

结果

讨论

参考文献

第二部分大鼠骨髓间充质干细胞的体外培养和诱导

材料

方法

结果

讨论

参考文献

第三部分VEGF基因转染大鼠骨髓间充质干细胞

材料

方法

结果

讨论

参考文献

第四部分大鼠心肌梗死模型的制备

材料

方法

结果

讨论

参考文献

第五部分转染VEGF基因骨髓间充质干细胞移植改善心脏重构

材料

方法

结果

1组织标本的病理学检查

2荧光显微镜检查

3免疫组织化学检查

4心脏彩色多谱勒超声检查

5血浆VEGF检查

6统计结果

讨论

参考文献

小结

致谢

血管内皮细胞生长因子基因转染治疗冠心病研究进展

博士期间发表的文章