P2X受体在小鼠下丘脑LHRH神经元的表达

摘要

在细胞、分子和系统水平有可靠的证据证实胞外ATP通过活化嘌呤能受体在生理和病理过程中发挥重要作用。P2X受体是ATP门控离子通道，它介导了快速(10ms以内)选择性通透阳离子(Na+，K+和Ca2+)的过程。到目前为止已经从哺乳动物中克隆出7种不同的P2X亚型，它们可以同或异聚体的形式组装成ATP活化的离子通道。嘌呤能P2X受体在下丘脑各处都有表达，同时LHRH神经元广泛地分布于整个下丘脑，并投射至正中隆起，在那里这些神经元从轴突末梢将LHRH释放至下丘脑门脉系统。但是截至目前还没有P2X受体在LHRH神经元表达的相关报道。
　　 本实验我们用免疫荧光组织化学双标技术研究了ATP门控阳离子通道家族成员(P2X1，P2X2，P2X3，P2X4，P2X5和P2X6)在小鼠下丘脑LHRH神经元的表达情况。由于P2X7受体功能比较特异，可以作为非选择性通道，故本实验没有对P2X7受体的表达进行研究。
　　 本研究发现LHRH-免疫阳性(-ir)神经元主要定位于终板血管器(OVLT)周围的区域，而LHRH-ir纤维主要定位于OVLT和正中隆起(ME)。我们观察到OVLT周围区域神经元的不同亚群表达P2X2、P2X4、P2X5和P2X6受体，而没有观察到P2X1和P2X3受体表达。而在发现大量LHRH-ir纤维的ME区和OVLT区，只看到类似于LHRH-ir纤维的P2X6受体免疫反应阳性纤维。
　　 我们用免疫荧光组织化学双标技术观察到所有LHRH-ir神经元分别也被P2X2、P2X4、P2X5和P2X6受体抗体染色，但它们的免疫染色强度有所不同，用不同抗体进行免疫染色发现它们的强度顺序是P2X6＞P2X4＞P2X2＞P2X5。所有LHRH-ir纤维也有高强度的P2X6抗体标记，只有一些LHRH-ir纤维，尤其是胞体附近的被P2X2抗体标记，但是ME区和OVLT区的LHRH-ir纤维并没被P2X2受体抗体标记，几乎没有LHRH-ir纤维标记有P2X4或P2X5受体抗体。
　　 我们又用免疫荧光组织化学双标技术研究了小鼠前脑中P2X受体蛋白和LHRH-ir神经元的共定位。这项研究首次证实了P2X2、P2X4、P2X5和P2X6表达于LHRH神经元，从而为小鼠前脑水平嘌呤能系统和LHRH系统之间可能的功能性相互作用奠定了坚实的神经解剖学基础。
　　 简而言之，本研究发现在LHRH神经元胞体和轴突末梢有不同P2X受体亚单位的表达。首次发现P2X2、P2X4、P2X5和P2X6表达于LHRH神经元胞体，而P2X2和P2X6也表达于LHRH神经元的轴突末梢。这些结果提示在突触前或突触后不同的同或异聚P2X受体被ATP激活以后能够对前脑水平LHRH的分泌起调节作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

一、前言

二、材料与方法

三、结果

四、讨论

五、结论

六、参考文献

Ⅴ.综述：P2X受体在下丘脑垂体系统的表达和功能

Ⅵ.在读期间发表的论文

Ⅶ.致谢