热休克蛋白70复合物抗人肝癌免疫的实验研究

摘要

目的：为研究HSP70在不同人肝癌细胞系及组织中的表达规律,以便为以后的提纯和免疫研究做基础,实验中首先用免疫组化、免疫荧光和流式细胞仪技术检测了不同人肝癌细胞系中HSP70的表达,结果发现,不同人肝癌细胞系在热处理前有不同程度表达,应激后HSP70表达明显升高,在热处理后不同时间段呈现了HSP从胞浆-胞核-胞浆的表达规律,研究发现HSP70在热应激处理后16h表达量达到最高.实验结果提示：1.肝癌细胞系热应激前、后均有一定程度的HSP70表达,热应激后表达明显升高,并在一定时间段呈现了动态表达规律;2.体内、外细胞毒试验表明从人肝癌细胞和肝癌组织提取的HSP70复合物具有一定特异性,对自身肿瘤细胞呈现了较高而特异的杀伤效应;3.体外重建AFP/HSP70复合物,能在动物体内诱发针对表达AFP肿瘤细胞的一定的杀伤效应,为建立对肝癌普遍有效的疫苗奠定了基础.以上的研究结果提示对肝癌的免疫治疗可以在无须明确肿瘤抗原的基础上,通过体外重组或提取HSP70蛋白的方法进行体内免疫的方案来获得针对自身肿瘤细胞相对特异的细胞毒效应,上述研究为肝癌综合治疗方案提供了有益的探索,奠定了良好的基础.

目录

中英文缩略词

前言

文献回顾

一、HSPs家族的分类

二、HSP70的分子结构和基因表达调控

三、HSP70的生物学功能

四、HSP70和肿瘤免疫

1、HSP70在肿瘤组织中的表达及意义

2、HSP70与肿瘤免疫

3、HSP70与肝癌

4、HSP70在肿瘤生物治疗中的意义及应用前景

第一部分人肝癌细胞系HSP70的表达及意义

一、实验材料

二、实验方法

三、结果

四、讨论

第二部分人肝癌HSP70复合物的提取、鉴定及其抗人肝癌免疫的实验研究

一、实验材料

二、实验方法

三、结果

四、讨论

第三部分AFP/HSP70重组蛋白表达载体的构建及其基因免疫的初步研究

一、实验材料

二、实验方法

三、结果

四、讨论

小结

致谢

参考文献