n-3系列和n-6系列高度不饱和脂肪酸对刺参生长、脂肪酸组成和免疫酶活性的影响

摘要

刺参（Apostichopusjaponicus）是中国北方主要养殖经济种类之一。刺参营养生理的研究对刺参的养殖具有重要的意义。本实验以刺参幼参为研究对象，探讨饲料中多不饱和脂肪酸对刺参幼参的生长，体内脂肪酸代谢及免疫功能的影响。刺参的特异性免疫机制还不完善，主要依靠非特异性免疫来提高对疾病的抵抗力。细胞内溶菌酶(LSY)、超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)的活性是反映机体非特异性免疫能力的重要指标，在海参的防御反应中发挥着重要的作用。所以本实验选择LSY、SOD、ACP三种酶活性作为刺参免疫指标。
　　 实验以裂壶藻、花生油、鱼油、ARA油、橄榄油和核桃油作为二十二碳六烯酸(22(:)6n-3，DHA)、二十碳五烯酸(20(:)5n-3，EPA)、亚麻酸(ALA)、亚油酸(LOA)、花生四烯酸（ARA）的脂肪酸源，配制了20种不同DHA、EPA、亚麻酸、ARA、LOA含量的饲料，进行了49天的养殖实验。通过对生长、体内脂肪酸、免疫相关酶活性等指标的测定以及对这些数据的统计学分析，得到以下主要结果:
　　 1.饲料中DHA、EPA、亚麻酸含量对刺参幼参的生长、体内脂肪酸的组成及其免疫力均有显著影响。饲料中DHA含量对刺参生长具有影响，当饲料中DHA含量低于0.84％（占脂肪酸比例）时，实验刺参的增重率显著低于其他各组(P＜0.05)。随着饲料中DHA含量的升高，刺参的增重率，体内粗蛋白质、粗脂肪含量显著上升，ACP、SOD、LSY活性也显著增强，当饲料中DHA含量为饲料脂肪酸含量的24.55％时，免疫相关酶达到最大活性。
　　 2.饲料中DHA、EPA比例对刺参幼参的生长及体内粗蛋白、粗脂肪的含量有显著影响，当饲料中DHA含量大于10.26％时，实验刺参的增重率、体内粗蛋白、粗脂肪含量随饲料脂肪酸中DHA与EPA比值下降逐渐上升。刺参幼参饲料脂肪酸中最适DHA、EPA比值为1.2∶1。刺参体内粗脂肪含量随着饲料中DHA、EPA占脂肪酸比例的升高都明显的升高。各处理组之间刺参体内灰分及水分无显著差异(P＞0.05)。
　　 3.饲料中EPA含量对刺参体内EPA含量影响不显著。尤其当饲料中EPA含量不足时，刺参体内EPA含量并未受到明显影响(P＞0.05)，说明刺参能够利用其他脂肪酸合成EPA。饲料中DHA含量对刺参体内DHA含量有显著影响(P＜0.05)，当饲料中DHA占脂肪酸比例为28.65％时刺参体内的DHA含量最高，为脂肪酸的5.27％。
　　 4.饲料中亚麻酸含量对实验刺参的增重率及体内粗蛋白含量均有显著的影响。随着饲料中亚麻酸含量的升高，实验刺参的增重率和粗蛋白含量升高，当亚麻酸含量为总脂肪酸含量的1.77％时刺参的增重率和粗脂肪含量达到最高;为2.79％时刺参体内粗蛋白含量最高。饲料中亚麻酸含量对刺参体成分中DHA含量的无显著影响(P＞0.05)。饲料中亚麻酸含量对刺参体成分中的EPA含量有影响(P＜0.05)。刺参体内SOD和LSY的活性在亚麻酸含量为1.77％时达到最高，刺参体内ACP的活性在亚麻酸含量为3.64％时达到最高值。随着亚麻酸含量的继续增加这三种免疫相关酶活性逐渐降低。
　　 5.饲料中LOA、ARA含量对刺参生长具有显著影响。当饲料中LOA含量为总脂肪酸的9.04％时，刺参增重率明显高于其他LOA含量各组，饲料中LOA含量对刺参体内粗脂肪、粗蛋白、粗灰分及水分含量无显著影响(P＞0.05)。饲料中LOA的含量对刺参体内ARA含量的影响显著，当饲料中LOA含量为9.04％时刺参体内的ARA含量达到最高，为22.94％。随着饲料中LOA含量的继续增加，刺参体内ARA含量逐渐减小，说明刺参可能具有将LOA转换合成ARA的能力。饲料中ARA的含量对刺参生长具有显著影响，实验刺参增重率随饲料中ARA含量的增加而显著升高。当饲料中ARA含量为8.29％时，实验刺参增重率最高，为34.51％。饲料中ARA含量对刺参体内粗蛋白含量无显著影响，而对粗脂肪含量有显著影响，当饲料中ARA含量为4.55％时，实验刺参体内粗脂肪含量最高，为3.47％。随着饲料中ARA含量的增加，刺参体内的EPA、ARA和LOA的含量增加，当饲料中的ARA含量达到11.08％时EPA、ARA和LOA含量达到最高，随着饲料中ARA含量的继续增加，EPA、ARA和LOA含量逐渐减小。但刺参体内的DHA、EPA在随饲料中ARA含量的提高出现了一定程度的升高。可以推测，刺参具有从其它脂肪酸转换合成体内必需的DHA和EPA的能力，并且这种合成能力受到饲料中脂肪酸含量的影响。
　　 6.本实验中，饲料中LOA的含量对刺参体内ACP和SOD的活性随饲料中LOA含量的增加而逐渐降低。亚油酸与亚麻酸比值为8～9时，刺参生长最快，免疫相关酶活性较高。实验刺参体内ACP活性随饲料中ARA含量的提高而逐渐降低;体内SOD活性也随饲料ARA含量的增加先增加而后减小。这再次证明了脂肪酸（多不饱乖脂肪酸）对机体功能具有重要的调节作用，某些多不饱和脂肪酸含量过高的可能对免疫力有着一定的抑制作用。

目录

摘要

第一章 多不饱和脂肪酸的营养、免疫研究进展

1 刺参的生物学特点

2 刺参的不饱和脂肪酸营养

3 多不饱和脂肪酸研究进展

3．1 不饱和脂肪酸对免疫功能调节的机制

3．2 多不饱和脂肪酸在水产动物中的营养研究

3．3 多不饱和脂肪酸在藻类中的营养研究

3．4 饲料中必需多不饱和脂肪酸组成比例的重要性

4 刺参的免疫系统

4．1 棘皮动物的免疫系统

4．2 免疫相关酶

第二章 n-3系列多不饱和脂肪酸含量对刺参生长、脂肪酸组成和免疫酶活性的影响

1 材料与方法

1．1 实验材料及实验条件

1．2 实验设计

1．3 实验饲料的配制

1．4 饲养实验

1．5 生化指标及测定方法

2 结果

2．1 饲料中n-3系列多不饱和脂肪酸含量对刺参生长、体成分及脂肪酸含量的影响

2．2 饲料中n-3系列多不饱和脂肪酸含量对刺参免疫相关酶活性的影响

3 讨论

3．1 饲料中不同n-3系列多不饱和脂肪酸含量对刺参生长、体成分及脂肪酸含量的影响

3．2 饲料中n-3系列多不饱和脂肪酸含量对刺参免疫相关酶活性的影响

第三章 n-6系列多不饱和脂肪酸含量对刺参生长、脂肪酸组成和免疫酶活性的影响

1 材料与方法

1．1 实验材料及实验条件

1．2 实验设计

1．3 实验饲料的配制

1．4 饲养实验

1．5 生化指标及测定方法

2 结果

2．1 饲料中n-6系列多不饱和脂肪酸含量对刺参生长、体成分和脂肪酸组成的影响

2．2 饲料中n-6系列多不饱和脂肪酸含量对剌参免疫相关酶活性的影响

3 讨论

3．1 饲料中n-6系列多不饱和脂肪酸含量对刺参生长、体成分及脂肪酸含量的影响

3．2 饲料中n-6系列多不饱和脂肪酸含量对刺参免疫相关酶活性的影响

4 总结与展望

参考文献

致谢

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