血管活性肠肽VIP对人结肠细胞系HT-29AQP8表达的调节研究

摘要

目的：检测在体外培养的人结肠上皮细胞系HT-29细胞水通道蛋白-8(AQP8)的表达情况，并研究血管活性肠肽(VIP)对其表达的调节作用，明确VIP参与肠道水转运的作用是否与AQP8的表达异常有关，探讨肠道水代谢的分子生物学机理，为临床治疗水代谢紊乱疾病提供一定的理论依据。 方法：采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(Fluorogenic probe quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction，FQ-RT-PCR)的方法测定VIP诱导的不同时间HT-29细胞AQP8 mRNA的表达，采用免疫细胞化学染色的方法测定VIP诱导的不同时间HT-29细胞AQP8蛋白的表达。 结果：在人结肠上皮细胞系HT-29细胞中AQP8 mRNA和蛋白都有表达。VIP诱导3h时AQP8蛋白和mRNA表达增高，并达峰值，此后逐渐下降。VIP诱导3h组HT-29细胞AQP8 mRNA的表达显著高于对照组和VIP诱导6h、12h、24h组(p<0.001)。VIP诱导6h、12h、24h组与对照组AQP8 mRNA表达差异均无显著性(p>0.05)，VIP诱导6h、12h、24h组之间AQP8 mRNA表达差异亦无显著性(p>0.05)。VIP诱导3h组HT-29细胞AQP8蛋白的表达显著高于对照组和VIP诱导6h、12h、24h组(p<0.001)。VIP诱导6h、12h、24h组与对照组AQP8蛋白表达差异均无显著性(p>0.05)，VIP诱导6h、12h、24h组之间AQP8蛋白表达差异亦无显著性(p>0.05)。 结论：1.AQP8主要在人结肠细胞膜丰富表达，胞浆内也有少量表达。2.VIP作用下的HT-29细胞AQP8mRNA和蛋白的表达均增加。 3.VIP对AQP8的表达可能是短期快速调节。VIP作用下AQP8表达在3小时时增高，并达峰值，此后至24小时呈逐渐下降趋势，说明VIP对其的调节作用是快速的。AQP8是双向水转运蛋白，在VIP促进水和电解质分泌过程中表达增加，使水向肠腔内转运增多，从而参与了腹泻的发生。推测AQP可能是VIP作用的最终靶分子之一。

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综述水通道蛋白在消化系统表达与调节的研究进展

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