苹果单倍体育种技术探究

摘要

单倍体育种是指通过雌核途径或雄核途径诱导单倍体产生，其后对染色体进行加倍，快速获得可正常结实的纯合个体，进而选育出新品种的育种技术。本文主要从花药培养和辐射花粉授粉两方面来探讨苹果单倍体育种技术。
　　本研究分为两个部分：⑴苹果花药培养：主要以11个品种材料，通过单因素试验和正交试验着重分析了基因型、预处理时间、蔗糖浓度、激素组合等因素对愈伤组织和胚状体诱导的影响，建立了苹果花药培养体系。结果表明：不同品种花药诱导能力差异明显，祝光胚诱导率高达34.3％，其次为红星；以红星苹果为例，诱导苹果胚状体的适宜低温处理时长为20-32d；培养基中添加5%蔗糖时，可明显提高红星苹果胚诱导率；当6-BA和NAA以2.0mg/L+0.1mg/L组合时，富士和千秋的胚状体诱导率最高；建立了苹果花药培养体系：胚诱导培养基：N6+2.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+0.3%活性炭+5%蔗糖+0.75%琼脂；植株分化培养基：MS+1.0-5.0 mg/L6-BA+0.1-0.3mg/LIBA；通过苹果花培胚发生途径共得到22株再生植株，其中千秋10株，富士7株，丹霞3株，嘎啦2株。经流式细胞仪鉴定倍性结果为：除2株千秋三倍体，1株千秋四倍体和1株富士四倍体外，其余植株均为二倍体。丹霞和嘎啦因植株幼小，暂无法取样以确定倍性。⑵在苹果孤雌生殖诱导单倍体：辐射花粉法是诱导苹果孤雌生殖的重要手段，了解辐射后胚发育过程对提高单倍体诱导率很有必要。本研究利用500Gyγ射线照射珊夏苹果花粉后，分别授于富士、王林柱头，观察其受精及胚发育过程，同时以正常花粉授粉为对照。结果表明：500Gyγ射线辐射后会降低富士、王林的结果率，影响果实大小，且不能产生正常、饱满的种子。显微观察结果表明：γ射线辐射后花粉能够萌发，花粉管能够正常伸长进入子房，可以形成胚细胞并能进行初期发育，但在20d时停止发育，40d时完全解体消失。因此，对γ射线处理后的富士、王林进行幼胚培养的最佳时期应以授粉后20d左右为宜。本研究结果为富士、王林孤雌生殖体系的建立提供了依据。

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第一章 文献综述

1.1果树单倍体育种目的及获得途径

1.2果树花药培养概述

1.3辐射花粉诱导孤雌生殖概述

1.4再生植株倍性鉴定

1.5苹果单倍体研究进展

1.6本研究的目的意义

第二章 苹果花培胚状体途径植株再生

2.1试验材料

2.2试验方法

2.3试验设计

2.4结果与分析

2.5讨论

第三章 γ射线辐射花粉对苹果受精及胚发育的影响

3.1试验材料

3.2试验方法

3.3技术路线

3.4结果与分析

3.5讨论

第四章 全文结论

4.1苹果花药培养

4.2辐射花粉授粉对苹果受精及胚发育的影响

参考文献

攻读学位期间取得的研究成果

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