Msi-1在大肠癌细胞中的作用及与大肠肿瘤病理特征的相关性研究

摘要

目的：研究大肠癌组织中Msi-1基因的表达情况，结合所收集病人的病理特征，进一步明确Msi-1基因与大肠癌生长的关系。探讨沉默 Msi-1基因表达对人大肠癌LOVO细胞周期、增殖、凋亡、侵袭与转移等生物学特性的作用及其机制的影响。
　　方法：培养大肠癌细胞HT-29、DLD-1、LOVO，筛选出表达适中的细胞；针对 Msi-1 mRNA序列设计合成干扰RNA，转染LOVO细胞，流式细胞仪观察转染效率，荧光定量PCR和Western Blot方法检测基因干扰后Msi-1 mRNA和蛋白的表达。CCK-8检测细胞增殖，Transwell肿瘤细胞迁移侵袭试验，分析沉默后肿瘤增殖、迁移侵袭的差异性；流式细胞机器测定Msi-1基因沉默后的细胞周期和细胞凋亡的状况。Western blot检测 OPN蛋白、CD44及与Msi-1的共表达情况。
　　结果：免疫组化显示结直肠癌组织中的Msi-1表达含量比正常大肠粘膜中Msi-1的表达量增加很多。LOVO细胞中Msi-1基因的表达量适中，干扰RNA序列621组的沉默效率最高，转染干扰序列后，Msi-1基因在RNA水平和蛋白水平的表达明显下降，大肠癌细胞LOVO在干扰后，细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力均明显下降，大肠癌细胞中OPN及CD44在RNA水平和蛋白水平表达均下调。
　　结论：利用 siRNA转染细胞后，可发现大肠癌LOVO细胞中 Msi-1基因的表达明显受到抑制。 Msi-1基因被沉默后，可抑制人大肠癌LOVO细胞生长，促进大肠癌细胞的凋亡，使细胞周期 G0/G1期的细胞增多，具有遏制作用，还在大肠癌转移中起到一定的作用。