温针灸对膝关节骨性关节炎模型兔关节软骨中MMP-1、13表达影响的研究

摘要

目的：本研究以膝关节骨性关节炎（Knee osteoarthritis，KOA）模型兔作为研究对象，旨在观察MMP-1、MMP-13在KOA模型兔关节软骨中的表达，研究温针灸对KOA模型兔MMP-1、MMP-13的调控作用，探讨KOA模型兔软骨中的蛋白表达水平的变化情况，为温针灸治疗KOA提供理论支持。
　　方法：采用膝关节石膏制动法6周建立兔KOA模型，40只新西兰兔平均体重在2.5～3kg之间。按照实验要求随机分为4组：空白组、模型组、温针灸组和扶他林组，每组10只。治疗干预15天后取材，并通过HE染色观察各组关节软骨的形态变化，免疫组化观察MMP-1和MMP-13在各组关节软骨中的分布表达情况，Western Blot检测法分别检测各组兔软骨中MMP-1、MMP-13蛋白含量的表达，分析空白组、模型组、温针灸组与扶他林组MMP-1、MMP-13的差异性。
　　结果：1.HE染色显示的结果：空白组软骨层较厚，软骨组织的染色相对均匀，软骨细胞的排列较为整齐，光镜显示软骨组织表面光滑平整，且完整；模型组软骨层变薄，关节软骨细胞排列不均，并大量簇聚；温针灸组显示软骨层有一定程度的增加，表面光滑，着色尚且均匀，表面基本完整；扶他林组与模型组软骨曾明显变薄，可见不同程度的裂隙，表面不光滑甚至出现局部的破坏。
　　2.免疫组化检测光学显微镜下MMP-1和MMP-13表达的阳性结果分布：空白组中MMP-1、MMP-13只有散在的阳性表达，且表达不明显；模型组软骨细胞着色较相对较深，主要以颜色较深棕黄色褐色颗粒为主，且细胞外基质中也有少量着色；温针灸组软骨细胞MMP-1、MMP-13的阳性表达主要以浅棕褐色的颗粒为主，表层稍有分布深褐色颗粒；扶他林组的阳性表达较为明显，而且表层与中层颜色较深的棕黄色颗粒分布较高。
　　3.免疫组化结果显示：与空白组相比模型组MMP-1、MMP-13的表达明显的升高，有统计学差异（P<0.05）；温针灸组与模型组相比，有效抑制了MMP-1、MMP-13的表达，有统计学意义（P<0.05）；扶他林组与模型组相比，抑制了MMP-1、MMP-13的表达（P<0.05），但无温针灸组对抑制MMP-1、MMP-13表达的作用明显，且差异有统计学意义（P<0.05）。
　　4.Western Blot检测结果显示：与空白组相比模型组上调了MMP-1、MMP-13蛋白相对表达量，且差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组相比，温针灸组抑制了上调的MMP-1、MMP-13蛋白表达量，且差异有统计学意义（P<0.05）；与扶他林组相比温针灸组对抑制上调的MMP-1、MMP-13蛋白相对表达量更为明显，有统计学差异（P<0.05）。
　　结论：MMP-1和MMP-13在KOA模型兔关节软骨中的表达均有不同程度的升高；温针灸能够有效抑制MMP-1和MMP-13在KOA模型兔关节软骨中的表达；温针灸可能是通过抑制MMP-1和MMP-13的表达，来发挥其对KOA的治疗作用。

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前言

材料与方法

1 材料

2. 实验方法

3. 统计学方法

结果

1. HE染色结果

2. 免疫组化结果

3.Western Blot方法检测结果

讨论

1. KOA的定义

2. KOA的临床治疗

3. KOA模型兔的建造

4. 取穴原则

5. 结果分析

结论

参考文献

文献综述

综述参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

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