肝素化选择性羊ADM促进深二度烧伤创面愈合及对创面组织中成纤维细胞凋亡的影响

摘要

目的：1.制作肝素化选择性羊脱细胞真皮基质(acelluardermalmatrix，ADM)。2.运用肝素化羊ADM治疗大鼠深二度烫伤，研究烫伤创面愈合率和创面组织结构的变化情况。3.探讨肝素化羊ADM治疗烧伤创面时，创面组织中细胞凋亡的变化情况，从而揭示该生物敷料在促进创面愈合的一些机制。
　　方法：1.选择1岁龄健康绵羊，取断层皮片制作选择性羊ADM。2.160只健康Wistar大鼠制作成深二度烫伤模型，随机分为碘伏纱布治疗组、猪ADM治疗组、羊ADM治疗组和肝素化羊ADM治疗组。3.烫伤大鼠在术3d、7d、14d、21d和28d计算大鼠创面愈合率。并同时在各个时间段处死大鼠，取创面组织标本做HE染色和TUNEL原位细胞凋亡染色，观察创面愈合不同时期内组织结构变化情况。
　　结果：1.成功制作选择性羊ADM，表皮完整，真皮未见细胞成分、血管及皮肤附件。2.烫伤后14d、21d、28d时，猪ADM组、羊ADM组和肝素化羊ADM组的创面愈合率均优于碘伏纱布组（P＜0.05），21d肝素化羊ADM组优于猪ADM组（P＜0.05），21d和28d时肝素化羊ADM组优于羊ADM组(P＜0.05)。3.各组创面HE染色显示，伤后21d，猪ADM组和羊ADM组真皮层胶原纤维排列欠规整，成纤维细胞开始出现较多的增长。而肝素化羊ADM组伤后21天时表皮、真皮结构基本正常，胶原纤维排列比较规则。4.各组深二度在烫伤后第7d，各组创面组织中成纤维细胞的凋亡较3d时均有明显的增加，但各组间无明显的统计差异（P＞0.05）。随着大鼠创面的愈合，在烫伤后14d-28d，各组创面组织中的成纤维细胞凋亡数有明显的增加，猪ADM组、羊ADM组和肝素化羊ADM组中的细胞凋亡数均较碘伏纱布组有明显的增加（P＜0.05），其中尤以肝素化羊ADM治疗组在术后28d的数字最高（P＜0.05）。
　　结论：1.成功制作了选择性羊皮真皮基质。2.三种真皮基质治疗深二度烧伤创面，其中尤以肝素化羊ADM在促进创面愈合组织结构恢复方面的效果更好。3.肝素化羊ADM在烧伤创面愈合后期，较其它组能更加的诱导或促进创面肉芽组织中成纤维细胞的细胞凋亡，减少瘢痕的形成，从而促进创面修复愈合。

目录

声明

摘要

缩略表

1．前言

1．1 烧伤治疗中的难点

1．2 肝素在烧伤治疗中的应用

1．3 生物敷料在烧伤创面的应用

1．4 成纤维细胞凋亡与烧伤创面愈合的关系

2．材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 主要实验仪器

2．1．2 主要实验耗材及试剂

2．1．3 实验常用溶液及试剂配方

2．1．4 实验动物

2．2 实验方法

2．2．1 肝素化选择性羊ADM的制备

2．2．2 Wistar大鼠深二度烫伤模型的制作

2．2．3 大鼠深二度烫伤模型创面组织学观察

2．2．4 大鼠深二度烫伤创面愈合率计算

2．2．5 大鼠创面组织病理结构检测

2．2．6 TUNEL法检测创面组织原位细胞凋亡

2．3 统计学分析

3．实验结果

3．1 制备羊ADM及检测

3．1．1 制备羊ADM

3．1．2 选择性羊ADM病理结构检测

3．2 大鼠深二度烫伤模型制作及创面判断

3．2．1 大鼠深二度烫伤模型制作

3．2．2 大鼠深二度烫伤创面组织学观察

3．3 大鼠创面愈合率观察

3．4 大鼠创面组织病理结构检测

3．5 TUNEL法检测创面组织原位细胞凋亡

4．讨论

5．结论

参考文献

致谢

在读硕士其间发表论文情况