不同压力培养下星形胶质细胞对视网膜神经节细胞存活状态的影响

摘要

目的：
　　 青光眼是世界第二大致盲性眼病,视网膜神经节细胞(Retinal ganglion cells,RGC)的凋亡是青光眼发病的基本病理机制,眼内压升高是重要的危险因素,但是眼内压引起RGCs凋亡的确切机制还不清楚。有研究表明星形胶质细胞(Astrocytes,AS)在青光眼的发病中起着重要的作用,但其与RGCs凋亡的关系尚未明确。本实验通过在体外不同压力下对RGC-5(Retinalganglioncell-5)和AS进行单独和共同加压培养,检测其存活和凋亡情况,从而初步探讨两种细胞对压力的耐受性及相互影响。
　　 方法：
　　 把传代培养的RGC-5和AS分为三组:RGC-5单独培养组、AS单独培养组、RGC-5的与AS共同培养组,分别给予0mmHg、20mmHg、40mmHg、60mmHg持续24小时的加压培养。应用AnnexinV—FITC/PI双染流式细胞学和MTT的方法检测各组间细胞存活状态的差异。统计结果均以-x±s表示,各组间的比较用配对t检验分析方法,采用SPSS13.0软件进行统计分析。
　　 结果：
　　 1、GC-5细胞呈梭型,平均分裂时间为2-3天左右,细胞生长旺盛。
　　 培养的AS细胞呈星形,平均分裂时间为1.5-2天,细胞生长旺盛。
　　 2、检测结果显示在加压处理24h后随着压力的升高,各组细胞凋亡率不断增高,每组凋亡程度不同,在20mmHg时与正常培养细胞差异不明显,40mmHg时以早期凋亡为主,60mmHg时以晚期凋亡为主。
　　 3、T结果显示在加压处理24h后各组存活率随着压力的增高逐渐下降,各组间差异有显著的统计学意义(P<0.01)。
　　 结论：
　　 1、压力直接影响培养RGC-5和AS的存活状态;
　　 2、随压力的不断增高,RGC-5和AS的细胞存活率不断降低,细胞凋亡趋势明显;
　　 3、AS在压力升高的早期更加敏感,当压力在20mmHg和40mmHg时凋亡率未见明显增高趋势,在60mmHg时凋亡率升高明显;
　　 4、AS提高TRGC-5对压力的耐受性,RGC-5的共同培养组比单独培养组凋亡率低,存活率高。