EREG在肾癌和白血病患者临床样本中表达水平的比较分析及其对人肾癌786-O细胞恶性行为的影响

摘要

背景：EREG（Epiregulin）即上皮调节蛋白，是一种能够自分泌或旁分泌的表皮分子调节因子。作为表皮生长因子（Epidermal Growth Factor，EGF）家族中的一员，可以与ErebB受体酪氨酸激酶家族中的EGFR结合，能够使EGFR发生磷酸化，进而发挥多种生物学功能,它首先是在鼠源细胞的培养基中发现并分离出来的。多种研究结果显示，EREG的异常表达与肿瘤的恶性行为的发展存在密切关系，但在肾癌和白血病临床组织样本中的研究未见报道。本实验旨在通过研究EREG在肾癌和白血病临床样本中的表达水平，探讨EREG与临床病理因素的关系及其在癌症诊断和预后评估中的价值，从而能为肾癌、白血病等癌症的早期诊断和治疗提供帮助。
　　目的：1. EREG在肾透明细胞癌患者临床组织样本中的表达水平及与肾癌进展的相关性。2. EREG在不同白血病患者骨髓单核细胞中的表达水平测定及与白血病发生的相关性。3.重组蛋白EREG对人肾癌细胞株786-O体外增殖、迁移和侵袭能力的影响。
　　方法：1.收集55例肾透明细胞癌患者临床组织样本及其对应的正常癌旁组织，57例白血病患者及13例正常供体的临床样本。2.用qRT-PCR的方法对临床样本中的EREG的表达水平进行测定。3.根据详实的患者临床病理信息资料，采用统计学分析的方法分析EREG在肾癌患者组织和白血病患者样本中的表达水平与临床病理参数间的相关性。4.用统计学分析的方法，对EREG在白血病患者不同临床分型中的差异表达的比较分析及白血病患者在初发与完全缓解后EREG水平的变化。5.用MTT法检测重组人源EREG蛋白对786-O细胞体外增殖能力的影响。6.利用Transwell小室法检测重组人源EREG蛋白对786-O细胞体外迁移和侵袭能力的影响。
　　结果：1.EREG在肾透明细胞癌（ccRCC）组织总体水平低表达，与正常癌旁组织相比降低30.1%（P=0.0017），其中36例低表达，15例高表达，4例变化不明显。2.EREG表达水平与ccRCC患者的TNM分期分级显著相关（P=0.019），而与患者的性别、年龄、侧别、组织类型等临床病理参数无明显相关性(P>0.05)。3.与正常供体样本相比，EREG在白血病患者中的表达水平明显降低，总体水平降低了48.7%（P=0.0038）；EREG的差异表达与患者的年龄显著相关（P=0.020），与患者的性别无相关性（P>0.05）；在慢性粒细胞白血病（CML）患者中EREG的表达与正常供体组相比总体水平降低了45.4%（P=0.0027），其中28例低表达，4例高表达；在急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中EREG的表达与正常组相比总体水平降低46.0%（P=0.0267），其中11例是低表达，5例高表达，1例变化不明显；在急性粒细胞白血病（AML）患者中EREG的表达与正常组相比总体水平降低67.1%（P=0.0026），其中7例低表达，1例高表达。4.与白血病患者的初发状态相比，患者CR之后，EREG表达水平在CML患者样本中水平升高（P=0.049），在AML患者样本中水平也是升高的（P=0.0393）。5.人源重组EREG蛋白对786-O细胞体外增殖能力作用不明显，抑制786-O细胞的体外迁移和侵袭能力。
　　结论：1.在临床样本检测中，EREG mRNA在肾癌、白血病患者中的表达水平同正常组相比均是低表达。2.在肾癌患者组织中，EREG的差异表达与患者的性别、年龄、侧别、组织类型等临床病理参数无明显相关性，而与病理分期分级有显著相关。3.在白血病患者样本的检测中EREG mRNA的差异表达与患者的性别不相关，但与患者的年龄显著相关。4.慢性粒细胞白血病和急性粒细胞白血病患者在完全缓解后，EREG水平上升，可作为患者检测的潜在指标分子。5.人源重组EREG蛋白对肾癌786-O细胞体外增殖能力无影响，抑制细胞的迁移和侵袭能力。

目录

声明

前言

第一部分EREG在肾透明细胞癌和白血病患者临床样本中表达水平的比较分析及临床意义的初步研究

（一）材料与方法

1.材料

2.方法

（二）结果

1. EREG在肾癌组织及其配对正常癌旁组织样本中的表达

2. EREG水平与肾癌患者临床病理参数间的相关性分析

3. EREG在白血病患者及正常供体样本中的水平测定

4. EREG在白血病临床样本中的表达水平与患者临床病理参数间的相关性分析

5. EREG在白血病患者不同临床分型（CML、ALL、AML）中的差异性表达

（三）讨论

（四）结论

（五）参考文献

第二部分人源重组EREG蛋白对肾癌细胞株786-O细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的影响

（一）材料和方法

1.材料

2.方法

（二）结果

1.人源重组EREG蛋白对786-O细胞体外增殖能力无明显作用

2.人源重组EREG蛋白抑制786-O细胞体外迁移能力

3. 人源重组EREG蛋白抑制786-O细胞体外侵袭能力

（三）讨论

（四） 结论

（五） 参考文献

综述:EREG与恶性肿瘤的相关性研究

致谢