DNA载体介导的RNA干扰技术在肺癌基因治疗中应用的初步研究

摘要

RNA干扰(RNAi)技术是近年来发展起来的一种阻抑基因表达的新方法,其主要通过21-23nt短链RNA(siRNA)引起同源基因的mRNA降解,而使目的基因表达下降.该文,介绍了一种新的RNAi技术,即以质粒作为载体,介导体外合成的具有特殊结构的DNA片段,利用载体的U6-RNA的启动子,不断地在体内产生21-23nt siRNA而引起目的基因的沉默.该研究采用p53基因作为干涉的目的基因.目的:以P53基因为例,验证通过DNA载体,进行RNAi的可行性,为进一步使该技术应用于特异性阻断致癌基因表达打下基础.方法:体外合成与p53基因目的区域同源的具有特殊结构的双链DNA,通过脂质体将携带有此片段的质粒载体导入肺癌细胞株A549,以western印迹检测p53蛋白的表达.结果:通过DNA载体(质粒)介导体外合成的具有特殊结构的DNA片段,能成功地引起p53基因的沉默.该技术为探索肺癌的基因治疗提供一定的依据.

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前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

综述一 肺癌的基因治疗

综述二 RNA干扰技术

致谢