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植物异黄酮对去卵巢成年大鼠钙代谢影响的机理研究

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前言

第一部分 文献综述 1机体钙代谢

第一部分 文献综述 2更年期骨质疏松研究现状

第一部分 文献综述 3植物异黄酮研究进展

第一部分 文献综述 4研究展望

第二部分实验研究部分第一章植物异黄酮对大鼠骨骼和血清元素、生化指标影响的研究

第二部分实验研究部分第二章植物异黄酮对大鼠骨组织形态学和形态计量学影响

第二部分实验研究部分第三章大豆甙元对大鼠小肠上皮和骨细胞钙离子瞬间动态变化影响的研究

全文结论

参考文献

致谢

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摘要

大豆是中国常见食物,深受广大民众喜爱,葛根既是中医临床常用的大宗药材,也是我国传统食品,我国卫生部2000年和2002年两次公布葛根为“药食同源植物”。 中老年人尤其是女性,随着年龄增长和更年期的到来,卵巢功能逐渐衰退和雌激素水平下降,会导致肠钙吸收减少和骨钙的释放大于骨钙的沉积,骨量丢失,并发骨质疏松的可能性也随之增加。雌激素替代治疗是本症的重要治疗措施之一,但是该方法存在一定的副作用。大豆中异黄酮类化合物主要含有的染料木素,大豆甙元等,葛根中异黄酮类化合物主要以葛根素为主的,葛根素是大豆甙元的葡萄糖苷,而这些异黄酮类化合物与雌激素在化学结构上比较相似,因此理论上对骨钙代谢可能有改善作用。本实验以去卵巢的雌性成年大鼠作为更年期骨质疏松模型,通过观察大鼠血清生化指标、离体骨密度、骨骼和血清中相关元素含量,骨组织中骨小梁结构的形态计量,和急性分离的小肠上皮细胞和骨细胞钙离子动态,综合评价植物异黄酮-大豆甙元和葛根素对去卵巢大鼠骨钙代谢的作用。 实验包括: 一、植物异黄酮对更年期骨质疏松的功能性研究 50只3月龄SD雌性成年大鼠,手术切除双侧卵巢后7天灌胃给予葛根素和大豆甙元,同时设假手术组、模型组和己烯雌酚阳性对照组,连续3个月。处死后取骨骼及血清,测定大鼠股骨骨密度,胫骨和血清中钙、磷、锌、镁的含量,血清生化指标等。另取10只3月龄SD雌性成年大鼠,即时处死后测定上述指标。 结果显示给药3个月后服用葛根素和大豆甙元后的胫骨骨矿含量、骨钙含量、股骨骨密度显著高于模型组,说明用药后大鼠骨量得到增加;血清磷、锌、镁含量显著低于模型组,说明用药可以抑制由于切除卵巢雌激素缺失所致的骨代谢的高转换状态。因此本实验的结果显示:葛根素和大豆甙元具有增加骨密度,预防骨质疏松的作用,特别是葛根素与西药己烯雌酚疗法相接二、植物异黄酮对大鼠的骨组织形态学影响的研究 取受试各处理组新鲜右侧股骨测定骨长和近端,中端,远端横径后,置于中性福尔马林固定液中固定2天后,骨组织经脱钙、脱水、包埋、固定、切片,HE染色,用Image Pro Plus 5.1软件对大鼠胫骨远端生长板上方腔隙的松质骨进行观察、测算和定量分析骨小梁结构的基本参数。结果显示:葛根素和大豆甙元可以在一定程度上改善骨小梁结构,但疗效上与己烯雌酚还是有一段的差距,且葛根素在疗效上优于大豆甙元。 三、植物异黄酮对急性分离的小肠上皮细胞和骨细胞的钙离子动态影响 通过建立小肠上皮细胞和骨细胞的急性分离方法,得到离体大鼠小肠上皮细胞和骨细胞,用Fluo.3标记后,共聚焦显微镜下可见大豆甙元能通过L型钙通道影响急性分离的小肠上皮细胞和骨细胞内钙离子浓度。 因此葛根素和大豆甙元可以通过调节机体钙代谢来达到预防骨质疏松的目的,是很有前景的改善更年期骨质疏松症的天然产物。

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