声明
摘要
第1章绪论
1.1 miRNA的研究进展
1.1.1 miRNA的发现历程
1.1.2 miRNA的结构及其分类
1.1.3 miRNA的生物合成及作用机制
1.1.4 miRNA的表达特征
1.1.5 miRNA的功能
1.2果蝇的免疫研究进展
1.2.1果蝇的生物学特性以及优势
1.2.2果蝇的免疫学概况
1.2.3果蝇的体液免疫
1.2.4果蝇的细胞免疫
1.3 miRNA调控果蝇免疫的研究进展
1.4本论文研究的意义
1.5本论文的创新点
1.6本论文的技术路线
2.1引言
2.2实验材料、试剂和仪器
2.2.1实验材料
2.2.2实验试剂
2.2.3实验仪器
2.3实验方法
2.3.1果蝇的饲养
2.3.2果蝇样品的收集
2.3.3果蝇的菌液刺激
2.3.4果蝇致死率的观察
2.4实验结果与分析
2.4.1 miR-964相关果蝇株生存情况
2.5讨论
3.1引言
3.2实验材料、试剂和仪器
3.2.1实验材料
3.2.2实验试剂
3.2.3实验仪器
3.3实验方法
3.3.1果蝇的饲养
3.3.2果蝇样品的收集
3.3.3果蝇的菌液刺激
3.3.4 miR-964回复果蝇的构建
3.3.5果蝇Drosomycin-GFP报告基因系统
3.3.6果蝇的总RNA的提取
3.3.7果蝇的基因实时荧光定量PCR
3.3.8果蝇的miRNA实时荧光定量PCR
3.4实验结果与分析
3.4.2 miR-964相关果蝇株受M.luteus刺激后体内抗菌肽基因Drs的表达量
3.4.3 miR-964回复果蝇检测结果
3.5讨论
第4章miR-964靶基因的预测和筛选
4.1引言
4.2实验材料
4.2.2 miRanda预测软件
4.2.3 PITA预测软件
4.3实验方法
4.3.1数据收集
4.3.2靶基因预测软件
4.4.1 Toll信号通路相关的miR-964靶基因预测结果
4.5讨论
第5章体外验证miR-964靶标关系
5.1引言
5.2实验材料、试剂和仪器
5.2.1实验材料
5.2.2实验试剂
5.2.3实验仪器
5.3实验方法
5.3.2双荧光素酶报告系统实验的构建和检测
5.4实验结果与分析
5.4.1 miR-964相关靶位点信息
5.4.2双荧光素酶报告系统实验检测结果
5.5讨论
第6章体内验证miR-964靶标关系
6.1引言
6.2实验材料、试剂和仪器
6.2.1实验材料
6.2.2实验试剂
6.2.3实验仪器
6.3实验方法
6.3.1果蝇的饲养
6.3.2果蝇样品的收集
6.3.4果蝇的总RNA的提取
6.3.5果蝇的基因实时荧光定量PCR
6.3.6 Western Blotting
6.4实验结果与分析
6.4.1 miR-964高表达果蝇受M.luteus刺激后体内其他基因的表达量
6.4.2 Western Blotting结果
6.5讨论
第7章结论
附录
参考文献
在读期间发表的学术论文及研究成果
致谢
南京师范大学;