行为异常的老年大鼠纹状体多巴胺含量的研究

摘要

目的:帕金森病(PD)是一种进行性神经系统退行性疾病,主要源于中脑黑质致密部(SNpc)多巴胺神经元退行性变导致的神经元死亡。目前常用的6-OHDA制备的大鼠PD模型和MPTP制备的小鼠PD模型虽然在发病机制上与原发性PD病人十分相近,但病理上却未发现特征性的Lewy小体。研究行为异常的老年大鼠纹状体多巴胺含量及黑质凋亡相关蛋白Bad、Bcl-2的表达情况,探讨其相互关系,为PD的早期发病机制的研究提供一定的理论依据。
　　 方法:将78只老年SD大鼠进行行为学筛选,首先进行衣架试验,按评分高低进行排序(评分相同的按照潜伏期长短排序),挑选出前30只和后30只;然后进行水迷宫试验,按照其找到圆台的时间长短排序,从评分较高的前30只中挑选所用时间短的前12只作为行为学反应好的老年大鼠组(老年优组),从后30只中挑选出所用时间长的前12只作为行为学反应差的老年大鼠组(老年差组);再取12只健康成年SD大鼠作为对照(成年组);每组6只用于免疫组化染色,6只用于免疫印迹及高效液相色谱-质谱检测;采用高效液相色谱-质谱联用法测定纹状体内多巴胺含量;采用免疫印迹法检测黑质TH、Bad、Bcl-2的表达情况;采用免疫组化染色法观察黑质部TH+细胞。
　　 结果:
　　 (1)行为学筛选结果显示衣架试验:评分结果老年优组＞老年差组:潜伏期老年优组＞老年差组,差异均有统计学意义;水迷宫试验:老年大鼠找到圆台的时间老年差组＞老年优组,差异有统计学意义,所以老年优组的行为学反应优于老年差组。
　　 (2)高效液相色谱-质谱联用法测定纹状体DA含量结果显示:成年组＞老年优组＞老年差组。老年优组高于老年差组,二者差异有统计学意义;成年组高于老年优组,二者差异有统计学意义。
　　 (3)免疫印迹法结果显示;大鼠黑质部TH总蛋白的表达:成年组＞老年优组＞老年差组,成年组与老年优组,老年优组与老年差组之间差异均无统计学意义,成年组与老年差组之间差异有统计学意义;促凋亡蛋白bad的表达:成年组＜老年优组＜老年差组,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达:成年组＞老年优组＞老年差组,成年组与老年差组之间差异均有统计学意义,成年组与老年优组,老年优组与老年差组比较,差异均无统计学意义。
　　 (4)免疫组化染色结果显示成年组大鼠黑质致密部TH+细胞成簇分布,排列密集,胞体大,形状规则,胞浆丰富,胞核着色淡,核仁明显,胞质染色深;老年差组大鼠黑质致密部TH+细胞散在分布,TH+细胞数量少,胞体小,胞浆染色较淡,核仁不明显;老年优组大鼠黑质致密部TH+细胞形态介于两者之间。
　　 结论:行为学反应差的老年大鼠纹状体DA含量水平降低,与黑质DA能神经元功能下降有关,凋亡机制可能参与其中病理过程。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词表

前言

材料和方法

1.材料

2.方法

结果

讨论

结论

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参考文献

综述 细胞移植治疗帕金森病的研究进展

攻读硕士学位期间发表学术论文题目

临床培训小结

致谢