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鼻息肉组织中Il-9和Il-7及Foxp3的表达及意义

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摘要

第一章 绪论

1.1 CD4+T细胞

1.1.1 Th17细胞

1.1.2 Th9细胞

1.1.3 Treg细胞

1.2 细胞因子

1.2.1 IL-17

1.2.2 IL-9

1.3 本论文研究之目的、方法及实验方案的设计、意义

第二章 IL-9、IL17及Foxp3因子在鼻息肉组织中的表达及意义

2.1 实验仪器和试剂

2.1.1 实验仪器

2.1.2 主要试剂

2.1.3 主要试剂配制

2.2 方法

2.2.1 临床资料获取

2.2.2 取材、固定、包理、切片

2.2.3 HE染色

2.2.4 免疫组织化学检测

2.3 结果

2.3.1 结果判定标准

2.3.2 免疫组化结果

2.3.3 IL-9、IL-17及Foxp3在鼻息肉组织及对照组织中的表达

2.4 统计学分析

2.5 讨论

2.6 展望

参考文献

综述 Th9细胞、Th17细胞及Treg细胞在鼻息肉发病中的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的文章

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摘要

鼻息肉是耳鼻喉科常见的多发病,在其形成和发展过程中感染、解剖异常、变应性因素、内环境和代谢紊乱等因素都起着重要作用。在各种致病因素的作用下,炎症细胞浸润、多种细胞因子、炎症递质等导致鼻黏膜损伤、上皮断裂、间质水肿,进而在多种细胞因子作用下导致上皮细胞增殖、凋亡失衡、组织重塑、纤维组织及血管增生、腺体囊性扩张等一系列病理过程,最终导致鼻息肉的形成。近年来的研究发现在慢性气道炎症性疾病中分泌白细胞介素9(Interleukin-9,IL-9)因子的辅助性9细胞(T help9 cells,Th9)、分泌白细胞介素17(Interleukin-17,IL-17)因子的辅助性17细胞(T help17 cells,Th17)及调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)通过不同的作用机制起着非常重要的效应功能。在慢性气道炎症性疾病如支气管哮喘中,多种炎症细胞和组织细胞在IL-9的作用下产生一系列效应。在哮喘等气道炎性疾病患者的支气管组织中IL-17的mRNA表达明显升高,而且随着患者疾病情况的不断加重,其表达水平相应的不断提高。鼻息肉作为上呼吸道慢性炎性病变的一种,我们是否可推测在其发生发展过程中Th9、Th17及Treg细胞这三者也扮演者重要角色。
  目的:观察IL-9、IL-17以及叉头状转录因子(fork head box P3,Foxp3)各自在鼻腔炎性组织鼻息肉组织中的表达情况,初步探索研究Th9细胞及Th17/Treg细胞失衡等有关因素在鼻腔炎性疾病如鼻息肉的发病机制过程中所起的相关作用。
  方法:鼻息肉组共40例,为鼻息肉手术患者的鼻息肉组织标本,对照组20例,为鼻中隔手术患者的正常中鼻甲黏膜。医院伦理委员会已对本研究进行审查并通过,所有患者都已知晓相关情况并签署知情同意书。采用免疫组织化学二步法检测IL-9、IL-17以及Foxp3分别在鼻息肉标本及正常中鼻甲黏膜中的表达水平。对检测结果运用SPSS16.0统计软件进行x2检验,并对组间差异进行比较,若P<0.05为差异有统计学意义。
  结果:采用显微镜下观察,阳性判定指标为胞浆和(或)胞核出现深褐色或棕黄色颗粒,颜色深者表示相应物质表达多,阳性强。本实验免疫组织化学检测结果显示,IL-9主要在淋巴细胞胞质中表达,IL-17在细胞中表达的部位与IL-9相似,也主要表达于淋巴细胞胞质中,还有少部分出现在上皮细胞棘细胞层之浆液腺泡中,而Foxp3则主要在淋巴细胞胞核中表达,在浆细胞及血管内皮细胞二者中亦有少数表达。鼻息肉组织中IL-9阳性率为75.0%,IL-17阳性率为80.0%,而对照组IL-9阳性率为35.0%,IL-17阳性率为50.0%,两者在鼻息肉组表达显著高于对照组,而Foxp3的表达水平(37.5%)显著低于对照组(80%),均P<0.05。
  结论:细胞因子IL-9和IL-17二者与鼻腔炎症性疾病如鼻息肉的发病有着密切关联,推测鼻息肉组织中可能有着显著的Th9细胞浸润现象,而且存在Th17/Treg细胞失衡,在鼻息肉的发生和进展中这两个要素或许扮演重要角色。

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