ITGA3在卵巢上皮细胞癌中的表达及意义

摘要

目的：
　　通过检测整合素亚单位α3（integrin subunitα3，ITGA3）在卵巢不同细胞系及组织中的表达水平，探讨ITGA3与卵巢上皮细胞癌间的关系，并分析ITGA3的表达与患者临床参数的相关性，为接下来研究其在卵巢癌发生、发展中的分子机制及靶向治疗提供实验依据。
　　方法：
　　（1）利用实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）检测ITGA3在正常卵巢上皮细胞系、各种卵巢癌细胞系、卵巢良性组织与卵巢上皮细胞癌组织中的mRNA表达水平。
　　（2）免疫组化方法检测ITGA3在良性卵巢组织与上皮性卵巢癌组织中的蛋白表达情况。本研究用病理切片来自江苏大学附属医院、江苏大学附属人民医院及连云港市第二人民医院2013年至2016年术后病理存档的卵巢组织，共65例，其中上皮性卵巢癌组织38例，卵巢良性组织27例。收集患者临床资料，分析ITGA3的蛋白表达与卵巢癌患者临床参数的相关性。
　　结果：
　　（1）ITGA3在SKOV3和OVCAR-3两种卵巢癌细胞系中的mRNA表达水平高于正常卵巢上皮细胞HOSEPIC（P<0.001）。
　　（2）ITGA3在上皮性卵巢癌组织中的mRNA表达水平明显高于卵巢良性组织（P<0.001）。
　　（3）免疫组化结果显示:卵巢良性组织和上皮性卵巢癌组织中均有ITGA3蛋白的表达，但卵巢良性组中仅有4例呈阳性，而上皮性卵巢癌组中有26例阳性表达，两组间差异具有统计学意义（P=0.000）。在病理分期越高、分化越差的卵巢癌组织中ITGA3蛋白的高表达越明显（P=0.016，P=0.003）。
　　结论：
　　ITGA3有可能作为判断上皮性卵巢癌恶性发展程度的标志，为制定临床治疗方案提供参考依据，并有可能对患者的预后作出评估和成为卵巢癌治疗的靶点。

目录

声明

主要英文缩写索引

第一章 绪论

1.1 卵巢上皮细胞癌（epithelial ovarian cancer, EOC）

1.1.1卵巢正常形态及生理功能

1.1.2卵巢癌的流行病学与病因

1.1.3卵巢癌的分类及相关研究

1.1.4卵巢癌的治疗与耐药性

1.2 整合素亚单位α3（ITGA3）

1.2.1整合素简介

1.2.2整合素的功能

1.3 实验研究的目的、方法、实验方案及研究意义

1.3.1实验研究目的

1.3.2研究方法

1.3.3实验设计方案

1.3.4研究意义

第二章 ITGA3在卵巢上皮细胞癌中的表达及意义

2.1实验材料

2.1.1临床标本

2.1.2实验主要试剂

2.1.3实验主要溶液的配制5×TBE溶液

2.1.4实验仪器与耗材

2.1.5引物序列及扩增长度

2.2 实验方法

2.2.1细胞培养

2.2.2细胞系总RNA的提取

2.2.3组织RNA的提取

2.2.4 PCR

2.2.5质粒构建

2.2.6实时荧光定量PCR（qRT-PCR）

2.2.7免疫组织化学染色（IHC）

2.2.8免疫组化结果评估

2.2.9统计学分析

2.3 实验结果

2.3.1 ITGA3和β-actin的PCR电泳结果

2.3.2 ITGA3和β-actin质粒标准曲线

2.3.3 ITGA3在卵巢各细胞系中的表达

2.3.4卵巢良、恶性组织中ITGA3在 mRNA水平的表达情况

2.3.5卵巢良、恶性组织中ITGA3在蛋白水平的表达情况

2.3.6上皮性卵巢癌组织中ITGA3的表达情况与临床参数的关系

2.4 讨论

第三章 主要结论与展望

3.1 主要结论

3.2 展望

参考文献

综述：整合素与肿瘤的研究

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文