四角菱角茎多酚的提取及体外抗氧化、抗肿瘤活性研究

摘要

目的：
　　优化四角菱角茎多酚的超声耦合双水相提取工艺，并对其提取物多酚进行体外抗氧化及抗肿瘤活性研究。
　　方法：
　　采用超声耦合双水相提取法，在单因素试验基础上，以多酚提取量和抗氧化活性指标—铁离子当量为应变量，对提取过程中的乙醇浓度、硫酸铵浓度、超声时间、超声温度等四个显著影响因素进行单因素实验，采用响应面设计方法优化四角菱角茎中多酚的提取工艺，并通过DPPH自由基、OH自由基、ABTS自由基清除能力、还原力等指标来评价其体外抗氧化活性。采用MTT法检测四角菱角茎多酚对人宫颈癌Hela细胞、脑胶质瘤U251、肺癌A549细胞体外增殖的影响，采用倒置相差生物显微镜观察细胞的形态变化，并采用流式细胞技术分析多酚对肺癌A549肿瘤细胞凋亡的影响。
　　结果：
　　超声耦合双水相提取四角菱角壳的最优提取条件为乙醇质量分数20.5%，硫酸铵质量分数25.7%，超声提取温度46℃，在此条件下多酚得率59.50 mg?g-1，铁离子当量55.62μmol?g-1，实验结果与模型预测值相符，且高于传统浸渍提取及超声提取得率。四角菱角茎多酚有较强的清除DPPH自由基、ABTS自由基及OH自由基的能力、有较强的还原力，说明其抗氧化能力较强。四角菱角茎多酚对人宫颈癌Hela细胞、脑胶质瘤U251、肺癌A549肿瘤细胞系的增殖都具有明显的抑制作用，IC50分别为66.82μg?mL-1、54.16μg?mL-1、49.83μg?mL-1，并呈现良好的量效关系，各肿瘤细胞系细胞数目明显减少，形态皱缩；流式细胞检测表明，四角菱角茎多酚能够剂量依赖性的诱导肺癌A549肿瘤细胞的凋亡。
　　结论：
　　采用超声耦合双水相法提取四角菱角茎多酚，响面法优化四角菱角茎多酚提取工艺方法简单、提取效率高、可预测性良好，值得推广使用。四角菱角茎酚类化合物具有显著的抗氧化活性，且能明显抑制人肺癌A549肿瘤细胞增殖，诱导其凋亡。

目录

声明

第一章 前言

1.2植物多酚类化合物的概述

1.3菱角的化学成分及生物活性

1.4总结

1.5本论文的立项背景、研究内容及意义

第二章 四角菱角茎中多酚超声耦合双水相提取工艺

2.3 试验方法

2.4超声耦合双水相提取四角菱角茎多酚的单因素实验结果与分析

2.5 响应面法优化超声耦合双水相四角菱角茎多酚提取条件优化

2.6本章小结

第三章 四角菱角茎多酚的抗氧化活性的研究

3.3 试验方法

3.4 结果与分析

3.5 实验小结

第四章 四角菱角茎多酚抗肿瘤活性评价

4.3 试验方法

4.4 统计学处理

4.5 结果

4.6 结论

第五章 结论与展望

参考文献

致谢

攻读研究生期间发表的论文