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蝴蝶兰组织培养研究

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摘要

1 绪论

1.1 研究背景

1.2 国内外研究进展

1.3 培养过程中克服褐变措施

1.4 研究的目的和意义

1.5 技术路线

2 研究内容与方法

2.1 试验材料

2.2 试验设计

2.2.1 外植体消毒灭菌

2.2.2 激素种类和激素浓度诱导处理

2.2.3 褐化现象的防治

2.2.4 生根培养

2.2.5 炼苗及移栽管理

3 结果与分析

3.1 不同灭菌时间对外植体的影响

3.2 不同激素以及pH组合对蝴蝶兰外植体的影响

3.2.1 不同激素以及pH组合对花梗的影响

3.2.2 不同激素以及pH组合对叶片的影响

3.3 不同类型的培养基对蝴蝶兰外植体的影响

3.3.1 不同类型的培养基对蝴蝶兰花梗的影响

3.3.2 不同类型的培养基对蝴蝶兰叶片的影响

3.4 不同激素组合对原球茎增值的影响

3.5 生根培养

3.6 炼苗

4 结论

4.1 不同灭菌时间对蝴蝶兰外植体的影响

4.2 不同激素以及pH组合对蝴蝶兰外植体的影响

4.3 不同激素组合对原球茎增值的影响

4.4 不同激素对蝴蝶兰生根培养的影响

4.5 不同炼苗方式对蝴蝶兰移栽苗的影响

5 讨论

5.1 不同激素及pH组合对蝴蝶兰外植体的影响

5.2 不同培养基对蝴蝶兰外植体的影响

5.3 不同激素对蝴蝶兰生根培养的影响

参考文献

附图

攻读学位期间的主要学术成果

致谢

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摘要

本文以蝴蝶兰满天红品种为研究材料,以花梗和叶片为外植体,通过对消毒方法、培养基种类、激素浓度、褐化现象等的研究,建立了一套通过蝴蝶兰组织培养快速繁殖的有效途径。主要结论如下:
  (1)蝴蝶兰花梗灭菌的最佳处理方法为用0.1%升汞消毒13分钟或15分钟,成功率达到85%以上;叶片最佳消毒处理的方法为:预处理后0.1%升汞灭菌13分钟,灭菌成功率达97.7%。
  (2)采用正交试验设计,结果表明最适宜蝴蝶兰花梗诱导的培养基配方为MS+琼脂(7.5g·L-1)以+蔗糖(30g·L-1)+6-BA(3.0mg·L-1)+NAA(2.5mg·L-1)+pH(5.6);叶片诱导的最佳组合为:MS+琼脂(7.5g·L-1)以+蔗糖(30g·L-1)+6-BA(5.0mg·L-1)+NAA(2.5mg·L-1)+pH(5.0)。
  (3)植物激素对蝴蝶兰类原球茎的实验研究表明,诱导蝴蝶兰原球茎的最佳激素组合为:6-BA(3.0mg·L-1)、NAA(0.5mg·L-1)和pH=5.4或6-BA(3.0mg·L-1)、NAA(1.0mg· L-1)和pH=5.6。
  (4)植物激素组合对蝴蝶兰生根率的影响较小,差异性不显著(P>0.05)。但不同激素组合对促进蝴蝶兰生根数及根长影响较大,更有利于生根,经方差分析,差异性均达到显著性水平(P<0.05)。适宜蝴蝶兰根培养的培养基最佳配方为:1/2MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA1.0-1.5 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7.5g·L-1,pH=5.4-5.6。
  (5)本实验采用的蝴蝶兰满天红品种,发现在蝴蝶兰花梗芽诱导的较优基本培养基为:MS基本培养基,诱导率为77.8%,高于1/2MS基本培养基(77.3%);叶片诱导的培养基为MS和1/2MS,考虑到苗的后续生长状况以及MS培养基的褐化现象较严重,而且1/2MS培养基更能节约成本,故选择1/2MS培养基为叶片萌发的培养基。

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