川芎嗪对大鼠脊髓急性损伤模型神经营养因子（NGF、BDNF、NT-3）表达的影响

摘要

目的：研究川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury，ASCI)模型的脊髓功能是否有保护作用及对损伤段脊髓神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(1)rain-derived nerve factor，BDNF)和神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)表达的影响。 方法：正常成年SD大鼠55只，随机分成三组：(1)正常对照组(N组，n=5)；(2)假治疗对照组(P组，n=25)；(3)实验组(T组，n=25)实验组和假治疗对照组大鼠按术后动物存活的时间再各分为1天组，3天组，7天组，14天组和21天组，共五个亚组，每亚组5只大鼠。采用改良ALLEN氏重物打击法制作脊髓中度损伤模型50个。实验组(T组)大鼠伤后30分钟后开始予川芎秦注射液经腹腔内注射200mg/kg，每天给药一次，1天组和3天组用药至死，7天组、14天组和21天组各用药5天。对照组(P组)大鼠给予等量的生理盐水经腹腔内注射，给药次数和实验组相同。在造模后的第1天，3天，7天，14天和21天共5个时间点分别处死对应的两组大鼠取脊髓标本，每只大鼠取以损伤段为中心的长约1cm的脊髓组织。在每个脊髓标本纵轴中心处连续横行切片3张，分别作NGF，BDNF和NT-3的免疫组化染色，观察各自的表达情况并计数。SPSS10.0统计分析软件对比两组动物的脊髓标本不同时间点神经营养因子(Neurotrophic factors，NTFs)的表达是否有显著性差异。此外，实验组和假治疗对照组在第7天，14天和21天处死的每只大鼠死前作改良Rivilin斜板实验和BBB评分，其中BBB评分从第3天处死的两组大鼠开始评分，以此评测脊髓运动神经功能，统计学分析两组间是否有显著性差异。 结果：术后1天时，两组大鼠间NGF，BDNF和NT-3表达数比较都无统计学意义。术后3天，7天和14天三个时间点上，三种神经营养因子表达数，实验组较假治疗对照组表达高，P值都小于0.05，有统计学意义。术后21天时，NGF表达计数实验组仍较对照组高，有统计学意义，而BDNF和NT-3则无统计学意义。NGF表达计数在术后7天时最高，BDNF和NT-3表达数则在术后3天时即达最高。改良Rivlin斜板实验结果在术后7天时，实验组和假治疗对照组比较无显著差异性，术后14天和21天时，两组间斜板临界度数比较t检验P<0.05，有显著差异性。 BBB评分结果术后3天时两组间无显著差异性，术后7天，14天和21天时，组间有显著性差异，并且BBB评分均值逐渐升高，组间比较P值逐渐减少。 结论：川芎嗪对脊髓继发性损伤可能有保护作用，这种保护作用可能与其能促进大鼠脊髓急性损伤模型损伤段脊髓神经营养因子(NGF、BDNF、NT-3)的表达相关。

目录

文摘

英文文摘

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第一章前言

第二章材料和方法

2.1主要设备和试剂

2.2大鼠分组和饲养

2.2.1分组和编号

2.2.2大鼠的饲养和管理

2.3大鼠急性脊髓损伤模型的制作

2.4大鼠的给药

2.5脊髓功能的行为学评分

2.5.1改良Rivlin斜板实验

2.5.2 BBB评分

2.6大鼠脊髓标本的收取

2.7大鼠脊髓组织蜡块切片

2.8 SABC法染色检测NTFs（按厂家的试验操作流程和标准进行）

第三章结果

3.1行为学评价

3.1.1改良Rivlin斜板实验

3.1.2BBB评分

3.2神经营养因子表达

3.2.1神经生长因子(NGF)表达检测结果

3.2.2脑源性神经生长因子（BDNF）表达检测结果

3.2.3神经营养素-3表达检测结果

3.3损伤段脊髓HE染色结果及部分图片

第四章讨论

4.1脊髓损伤模型的选择

4.2实验动物的给药

4.3脊髓损伤功能评价及方法选择

4.4神经营养因子和脊髓损伤

4.5川芎嗪对脊髓损伤的保护作用

4.6展望

第五章结论

参考文献

综述：急性脊髓损伤的药物和神经营养因子治疗

致谢

攻读学位期的主要成果