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C-6神经酰胺诱导外周血T细胞淋巴细胞凋亡及Caspase-3活性变化的实验研究

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摘要

缩略语表

第一章 前言

第二章 材料与方法

2.1 研究对象

2.2 试剂与仪器设备

2.3 实验方法与步骤

2.4 结果判断

2.5 统计学分析

第三章 实验结果

3.1 不同浓度的C-6神经酰胺诱导外周血T淋巴细胞凋亡结果及分析

3.2 不同浓度的C-6神经酰胺诱导外周血T淋巴细胞Caspase-3活性变化的结果及分析

附图

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述

致谢

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摘要

目的:
   本文通过研究经刀豆蛋白A(ConA)Ⅳ型体外激活的外周血T淋巴细胞,在C-6神经酰胺(C-6 ceramide,C6-cer)的诱导下,T淋巴细胞凋亡率及重要凋亡执行蛋白Caspase-3的活性变化状况,初步探讨C-6神经酰胺诱导T淋巴细胞凋亡的可行性,为C-6神经酰胺用于治疗口腔扁平苔藓提供依据。
   方法:
   随机选取25名年龄段为20~30岁健康人作为研究对象,其中男性12名,女性13名,且无长期用药史。将抽取的静脉血经淋巴细胞分离液和尼龙毛柱分离得到的T淋巴细胞,在conA(10 ug/ml)的激活下,用不同浓度0umol/l(A组)、5umol/l(B组)、10umol/l(C组)、20umol/l(D组)的C-6神经酰胺诱导,以无conA激活与C6神经酰胺干预为对照组,干预24小时。采用免疫细胞化学方法,在荧光显微镜下,测定细胞凋亡率;用酶联免疫法,用酶标仪检测T淋巴细胞中Caspase-3的活性变化。
   结果:
   (1)conA+C6-cer B、C、D组与conA+C6-cerA组比较,外周血T淋巴细胞凋亡率均有升高,(P<0.05),即随着C-6神经酰胺浓度的升高,凋亡率随着增加。
   (2)conA+C6-cer B、C、D组与conA+C6-cerA组比较,外周血T淋巴细胞Caspase-3活性均有升高,(P<0.05),即随着C-6神经酰胺浓度的升高,Caspase-3活性随着增加。
   (3)conA+C6-cer A组与对照组比较,外周血T淋巴细胞凋亡率降低(P<0.05)(4)conA+C6-cerA组与对照组比较,外周血T淋巴细胞Caspase-3活性无显著差异(P>0.05)。
   结论:
   (1)用ConA激活,C6-神经酰胺诱导下,健康人外周血T淋巴细胞凋亡率增加。
   (2)用ConA激活,C6-神经酰胺诱导下,健康人外周血T淋巴细胞caspase-3活性增强。

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