一个血管型皮肤弹性过度综合征家系致病基因的突变筛查

摘要

皮肤弹性过度综合征(Ehler-Danlos syndrome，EDS)，系一种由于先天性的缺陷使结缔组织中某种成分（如胶原、弹性蛋白或糖胺聚糖）的生物合成或降解发生异常而引起的结缔组织缺陷病。EDS的发病率为1/10，000-1/25，000，其中Vascular EDS患者不足5％。VascularEDS即EDSⅣ型(Ehler-Danlos syndrome typeⅣ, EDS typeⅣ,OMIM130050)主要表现为频繁的出血倾向，皮肤薄，反复的气胸和关节脱位。患者常见血管动脉瘤，70％的患者死于不可预测的动脉破裂。Vascular EDS一般有家族史，主要呈常染色体显性遗传。
　　COL3A(1)(collagen，typeⅢ，alpha1，OMIM120180)基因位于2q31-32.2，1988年Nicholls AC等人通过连锁分析发现血管型皮肤弹性过度综合征与这个区域的多态性标记共分离，表明该位点可能与Vascular EDS的发生有关。1989年Tromp等人对Vascular EDS患者检测时发现COL3A1基因突变导致第790位的甘氨酸变成丝氨酸。他们推测该突变可能影响Ⅲ型胶原蛋白分子三重螺旋结构从而导致疾病的发生。该基因包含51个外显子，长度约44kb，编码Ⅲ型胶原蛋白的前胶原(procollagen)。COL3A1基因突变会影响Ⅲ型胶原蛋白的合成，导致血管物理性质的改变、扩张性降低、血管破裂。
　　本研究中，我们收集了1个中国汉族血管型皮肤弹性过度综合征家系（共3例患者）和239例正常对照，采用PCR扩增和直接测序的方法分析患者与正常人的COL3A1基因序列的编码区域，由于 COL3A1基因有51个外显子，我们选择了已报道的突变热点外显子并对其进行了扩增和直接测序，寻找与血管型皮肤弹性过度综合征相关的突变。我们在家系中检测到COL3A1基因的错义突变c.2176G＞C，该突变导致第726位的甘氨酸变成了精氨酸。先证者(Ⅱ14)、患者(Ⅱ5，Ⅲ3)及家系成员Ⅳ1均携带突变c.2176G＞C，该突变在家系中与疾病表型共分离。通过NCBI SNP数据库中比对查找，发现c.2176G＞C在数据库中未见报道。随后我们用239个正常个体作为正常对照，针对COL3A1基因c.2176进行检测未发现该点突变。通过查询人类基因突变数据库(HGMD) c.2176G＞C尚未见收录，由此证实这是一个新发现的突变。目前突变的序列已经提交到基因序列数据库(Genebank)，编号为KC567894。
　　上述研究提示，COL3A1基因的错义突变c.2176G＞C可能导致了此家系血管型皮肤弹性过度综合征的发生。COL3A1的错义突变c.2176G＞C是个新突变，它的发现丰富了COL3A1突变的数据库并为此家系疾病的确诊和预防起到了积极作用。