肺癌患者血浆miR-302c和HSP90α的表达水平与化疗敏感性研究

摘要

目的： 本研究通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者化疗前后及耐药前后的血浆中miR-302c、HSP90α的表达量变化情况，分别分析血浆miR-302c和HSP90α的表达水平与化疗敏感性的研究，探讨血浆miR-302c和HSP90α的表达在肺癌化疗耐药中的临床价值。 方法： 1.收集2016年01月至2017年09月南华大学附属第一医院60例NSCLC初治患者的空腹静脉血各5ml。随访以上60例患者，以后每2周期化疗后评估化疗疗效，并于下一周期化疗前1天再次留取空腹静脉血5ml。最终共收集到30例临床评估为化疗耐药（化疗评估为SD/PD）患者的空腹静脉血。 2.选取同一病人对应的化疗前、化疗后非耐药及化疗后耐药血浆样本，共90管，提取血浆miRNA，逆转录合成c DNA，继而采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）技术检测肺癌患者miR-302c的表达量。对应血浆标本行酶联免疫吸附试验（EILISA）检测HSP90α表达水平。 3.使用SPSS22统计软件分析实验数据。本实验化疗前组、化疗后非耐药组、耐药组这三组组间比较用单因素方差分析。运用卡方检验分析肺癌患者血浆miRNA-302c表达水平与临床病理学特征中性别、年龄、吸烟史、分化程度、临床分期、淋巴结转移等因素的关系。用独立样本t检验分析HSP90α表达水平与临床病理学特征有无相关性。根据三组血浆miRNA-302c、HSP90α的检测结果，计算各组的平均相对表达量，分析肺癌患者化疗前组、化疗后非耐药组、耐药组血浆中miR-302c、HSP90α的表达水平变化，评价血浆miR-302c、HSP90α在肺癌化疗疗效评估、预测化疗耐药中的临床应用价值。 结果： 1.NSCLC患者化疗耐药组血浆miR-302c的表达水平明显高于化疗后非耐药组（P＜0.05）。 2.NSCLC患者化疗前组的血浆miR-302c的表达水平高于化疗后非耐药组，但差异无统计学意见（P＞0.05）。 3.NSCLC患者耐药组中血浆HSP90α表达水平高于化疗后非耐药组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 4.NSCLC患者化疗前组中血浆HSP90α表达水平高于化疗后非耐药组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 5.血浆miRNA-302c高表达与NSCLC淋巴结转移（P＜0.05）、远处转移（P＜0.05）相关，HSP90α的高表达与非小细胞肺癌远处转移相关（P＜0.05），而miRNA-302c、HSP90α的表达量均与肺癌的性别、年龄、分化程度、临床分期、吸烟史无显著相关(P＞0.05）。 6.miRNA-302c和HSP90α在NSCLC血浆中的表达成正相关（rs=0.423P=0.02）。 结论： 1.血浆miRNA-302c、HSP90α高表达与非小细胞肺癌化疗耐药相关。 2.血浆miRNA-302c和HSP90S可能是化疗药物疗效敏感性标志之一。 3.化疗耐药后血浆miRNA-302c表达上调，且与HSP90α的表达呈正相关。

目录

声明

主要缩略语英文索引

第1章 前 言

第2章 实验材料

2.1血浆标本

2.2主要试剂及试剂盒

2.3仪器

第3章 实验方法

3.1研究对象

3.2血浆标本的收集和处理

3.3.1血浆标本中micro RNA富集部分的提取

3.3.2 mi RNA引物设计与合成

3.3.3 逆转录

3.3.4实时荧光定量 PCR 反应体系

3.3.5统计学分析

3.4.1 Hsp90α试剂操作步骤

3.4.2统计分析

第4章 结 果

4.1.1肺癌患者化疗前后及耐药前后血浆中mi RNA-302c的表达水平

4.1.2化疗前血浆miR-302c的表达与非小细胞肺癌临床病理参数之间的关系

4.2.1肺癌患者化疗前后及耐药前后血浆中HSP90α的表达水平

4.2.2 HSP90α水平与肺癌各临床特征之间的关系

4.3 miR-302c和HSP90α表达在肺腺癌中的相关性

第5章 讨 论

第6章：结 论

参考文献

文献综述:血浆microRNA与肺癌耐药

攻读学位期间科研成果

致谢