乌头赤石脂汤抑制急性心肌梗死大鼠细胞凋亡的实验研究

摘要

目的:
　　通过研究乌头赤石脂汤对大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)模型细胞凋亡的药理作用，探讨乌头赤石脂汤抑制急性心肌梗死细胞凋亡的内在机制。
　　方法:
　　选取60只体重在250～320g之间的健康雄性Wistar大鼠，并随机分为正常组、模型组、乌头赤石脂汤低剂量组、乌头赤石脂汤中剂量组、乌头赤石脂汤高剂量组和尿激酶组。除正常组外，其他各组均采取高位结扎左冠状动脉前降支（the left anterior descendingcoronary arteries，LAD）复制大鼠急性心肌梗死模型。正常组和模型组自由觅食饮水。乌头赤石脂汤低、中和高剂量给予灌胃治疗。尿激酶组按照每天5万U/ml·只进行腹腔注射。持续治疗一周，第8天处死取材。记录造模当天和取材前大鼠的死亡数量，计算出造模后和取材前各组大鼠死亡率。A6半自动化动生化分析仪测定血清中肌钙蛋白T(troponin T，CTNT)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes，CK-MB)、天门冬氨基酸转移酶（aspartate amino transferase，AST）和谷丙转氨酶(alanineaminotransferase，ALT)的含量。苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining，HE)观察各组大鼠心肌的形态学变化。蛋白印迹法(Western Blot，WB)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(B-cell lymphoma/leukemia-2，Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 assaciatedX protein，Bax)的表达水平。
　　结果:
　　1.除正常组以外，各组大鼠造模当天的死亡率在约20％～40％之间;取材前的死亡率在约0％～10％之间。
　　2.与正常组相比，模型组血清中CTNT、CK-MB、AST、ALT的含量显著升高(P＜0.01)。与模型组相比，乌头赤石脂汤低、中和高剂量组血清中CTNT(P＜0.01)、CK-MB(P＜0.05)、AST(P＜0.01)、ALT(P＜0.01)的含量均降低;尿激酶组血清中CTNT、CK-MB、AST、ALT的含量也均降低(P＜0.01)。与尿激酶组相比，乌头赤石脂汤低、中、高剂量组在降低血清中CTNT、CK-MB、AST、ALT的含量方面无明显差别。
　　3.与正常组相比，模型组细胞核固缩破碎，大量炎症细胞浸润，大片红细胞聚集，心肌纤维分离裂解。与模型组相比，乌头赤石脂汤低、中、高剂量组和尿激酶组心肌病理形态学皆有明显的好转。其中，乌头赤石脂汤低剂量组心肌仍可见局部红细胞聚集，部分炎性细胞散在分布，但心肌纤维排列整齐;乌头赤石脂汤中、高剂量组红细胞集聚明显减轻，炎性细胞浸润明显减少，心肌纤维排列有序。与尿激酶组相比，乌头赤石脂汤低、中、高剂量组心肌形态学无显著差异性。
　　4.与正常组相比，模型组心肌组织中Bcl-2表达显著下降(P＜0.01);Bax表达显著升高(P＜0.01)。与模型组相比，乌头赤石脂汤低剂量组心肌组织中Bcl-2表达和Bax表达无差异性。乌头赤石脂汤中、高剂量组和尿激酶组心肌组织中Bcl-2表达显著上调(P＜0.01);乌头赤石脂汤中剂量组(P＜0.05)、乌头赤石脂汤高剂量组(P＜0.01)和尿激酶组(P＜0.01)心肌组织中Bax表达明显下调。与尿激酶组相比，乌头赤石脂汤低、中剂量组心肌组织中Bcl-2表达有显著差异性(P＜0.01);乌头赤石脂汤高剂量组心肌组织中Bcl-2表达无明显差异。乌头赤石脂汤低剂量组心肌组织中Bax表达有显著差异性(P＜0.01);乌头赤石脂汤中、高剂量组心肌组织中Bax表达无差异性。
　　结论:
　　1.乌头赤石脂汤低、中、高剂量均能有效地减轻大鼠急性心肌梗死模型心肌损伤程度，且与尿激酶的疗效无明显差异。
　　2.乌头赤石脂汤中、高剂量对大鼠急性心肌梗死模型细胞凋亡具有抑制作用。其中，以高剂量的效果最佳，且与尿激酶的疗效无明显差异。3.乌头赤石脂汤中、高剂量抑制大鼠急性心肌梗死模型细胞凋亡的内在机制，与上调Bcl-2蛋白表达，下调Bax蛋白表达有关。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

文献综述 中医方药通过干预线粒体通路治疗AMI细胞凋亡的研究进展

1．线粒体介导细胞凋亡的发病机制

2．中医方药的治疗

3．展望与总结

实验研究

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

4 结论

5 讨论

致谢

参考文献