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益气解毒颗粒对鼻咽癌的抑癌效应及其细胞核仁总蛋白活性干预机制研究

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引言

第一部分材料与方法

1实验材料

1.1药物

1.2细胞

1.3动物

1.4主要试剂

1.5主要仪器设备

2实验方法

2.1细胞培养方法

2.2体外试验

2.3体内试验

2.4核仁总蛋白的提取纯化

2.5核仁总蛋白的二维电泳分离

3观察指标

3.1体外试验

3.2体内试验

4统计方法

第二部分结果与分析

1体外试验

1.1体外抗癌细胞增殖实验

1.2细胞形态改变

2体内试验

2.1移植瘤观察

2.2荷鼠瘤一般情况观察

2.3病理组织学观察

2.4核仁总蛋白二维电泳图、匹配图及蛋白原斑点分析

第三部分讨论

1中医学对鼻咽癌的认识

2益气解毒颗粒组方原则

3导师的学术观点

4肿瘤细胞酸性非组蛋白的研究概况

5益气解毒颗粒对鼻咽癌的抑癌效应

6益气解毒颗粒干预后鼻咽癌细胞核仁总蛋白的变化

7益气解毒颗粒对鼻咽癌抑瘤效应的核仁蛋白活性干预机制分析

8研究展望

结 论

参考文献

致 谢

附 录

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摘要

目的:探讨以扶正祛邪为组方原则的益气解毒颗粒剂对鼻咽癌的抑癌效应及其细胞核核仁总蛋白干预机制.方法:在体外实验中,先测定益气解毒颗粒剂对人鼻咽癌HNE3细胞及人宫颈癌HeLa细胞作用的IC50浓度,再观察其干预后这些细胞增殖活性变化、细胞形态改变.在体内实验中,进行了益气解毒颗粒干预裸鼠移植瘤的实验.用人鼻咽癌HNE3细胞及人宫颈癌HeLa细胞注射BALB/c裸鼠造模,采用完全随机设计,将BALB/c裸鼠按实验要求随机分为人鼻咽癌HNE3及人宫颈癌HeLa细胞两大组,每组又随机设益气解毒颗粒抑癌组、益气解毒颗粒抗癌组、生理盐水对照组.观察裸鼠活动力变化、抗瘤及抑瘤效果、组织学改变等指标.并将瘤体制备成药肿瘤细胞悬液,抽提纯化核仁总蛋白,再行二维电泳分析.结论:益气解毒颗粒可能通过调节细胞机能,改变肿瘤细胞核仁中rDNA转录活性,使得某些与细胞增殖相关蛋白质活性发生有利于细胞分化的变化,从而影响肿瘤细胞的增殖与分化.这可能是益气解毒颗粒剂抗鼻咽癌作用机理之一.

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