复合益生菌缓解蛋鸡热应激效果及机理研究

摘要

近年来，全球动物产业因热应激已造成了巨大的经济损失。因此本课题以蛋鸡热应激为出发点，旨在研究屎肠球菌HDRsEf1和枯草芽胞杆菌HDRaBS1复合益生菌制剂缓解动物热应激的可行性及其机制，为新型抗应激生物制剂的开发奠定理论基础和实践依据。
　　本试验选取856只280日龄产蛋率相近海兰褐商品蛋鸡，随机分为3个组:高温对照组(33℃)、复合益生菌组[100g/t屎肠球菌(50亿CFU/g)+400g/t枯草芽胞杆菌(100亿CFU/g)+33℃]、室温对照组(26℃)，每组3个重复，均饲喂玉米-豆粕基础日粮，试验期为20 d。试验结果及结论如下:
　　生产性能和鸡蛋品质方面:与高温对照组相比，该复合益生菌组在全期产蛋率、日采食量、平均蛋重方面分别提高了3.99％(P＜0.01)、6.29％(P＜0.05)、3.29％(P＜0.05)，但没有达到室温对照组水平，且在料蛋比、腹泻率、蛋破损率和鸡群死亡率等方面均有降低;在蛋壳厚度、强度、蛋白高度、蛋黄颜色和哈氏单位方面分别提高了4.35％(P＜0.05)、16.72％(P＜0.05)、15.19％(P＜0.05)、5.66％(P＞0.05)和6.56％(P＞0.05)。
　　血液指标方面:与高温对照组相比，该复合益生菌组在血清IL-1、内毒素、肾上腺素方面分别降低了28.38％(P＜0.05)、46.07％(P＜0.05)、31.68％(P＜0.05);IL-10、孕酮分别提高了137.34％(P＜0.05)、83.52％(P＜0.05)，而与TNF-α、ND-IgG相比差异不显著(P＞0.05)。
　　肠道屏障功能方面:利用Real-time PCR技术分析了回、盲肠中特定菌群数量的变化，通过分析该复合益生菌显著降低盲肠大肠杆菌的数量(P＜0.05)，显著升高回肠乳酸杆菌的数量(P＜0.05)，使失调的肠道菌群组成得到改善;通过Real-time PCR技术分析该复合益生菌能极显著上调紧密连接蛋白occludin、ZO-1（回、盲肠）和JAM-A（盲肠）基因mRNA的表达(P＜0.01)，上调回、盲肠黏膜修复基因EGF mRNA的表达(P＜0.01)，上调回、盲肠黏液蛋白MUC-2基因mRNA的表达(P＜0.01;10 d);组织切片结果分析该复合益生菌能显著提高肠绒毛高度(P＜0.01)，而隐窝深度之间无显著差异(P＞0.05);Western-blot方法分析该复合益生菌促进免疫蛋白A的表达和分泌。
　　由此可见，添加该复合益生菌能改善肠道菌群平衡、修复肠黏膜、上调紧密连接蛋白的表达，多层次地增强肠道屏障功能，从而能显著降低蛋鸡血清中内毒素和IL-1等核心因子含量，有效缓解蛋鸡热应激症状，提高其生长性能和鸡蛋品质。

目录

声明

摘要

缩略词(Abbreviation)

1 文献综述

1．1 应激与热应激相关国内外研究

1．1．1 应激的概念及学说

1．1．2 “热应激”的概念

1．1．3 热应激的调节机理

1．1．4 热应激对蛋鸡的危害

1．1．5 缓解蛋鸡热应激的措施

1．2 益生菌国内外的研究进展和未来的发展趋势

1．2．1 益生菌的概念及筛选标准

1．2．2 益生菌的主要作用机理

1．2．3 益生菌在家禽上的应用

1．2．4 益生菌的未来研究趋势

2 本研究的目的与意义

3 材料与方法

3．1 实验材料

3．1．1 益生菌株和载体

3．1．2 试验基础日粮

3．1．3 主要试剂及试剂盒

3．1．4 主要溶液的配制

3．1．5 主要仪器设备

3．2 实验方法

3．2．1 试验设计

3．2．2 试验过程

3．2．3 生产性能指标测定

3．2．4 鸡蛋品质测定

3．2．5 血液指标测定

3．2．6 肠道屏障功能测定

3．2．7 统计学分析

4 结果与分析

4．1 复合益生菌对热应激蛋鸡生产性能的影响

4．2 复合益生菌对热应激蛋鸡鸡蛋品质的影响

4．3 复合益生菌对热应激蛋鸡血液指标的影响

4．4 复合益生菌对热应激蛋鸡肠道屏障功能的影响

4．4．1 复合益生菌对热应激蛋鸡肠道菌群的影响

4．4．2 复合益生菌对热应激蛋鸡肠道化学屏障的影响

4．4．3 复合益生菌对热应激蛋鸡肠道机械／物理屏障的影响

5 讨论

5．1 复合菌株之间的配合问题

5．2 复合益生菌对热应激蛋鸡生产性能、鸡蛋品质的影响

5．3 复合益生菌对热应激蛋鸡血液指标的影响

5．4 复合益生菌对热应激蛋鸡肠道屏障的影响

6 结论

参考文献

在校期间完成的文章及专利

致谢