石竹DichAG、DichSTK基因克隆与表达探究

摘要

石竹（Dianthus chinensis）为石竹科石竹属多年生草本花卉，是具有较高经济价值的中国传统观赏花卉。研究发现AG亚家族基因与雌蕊、雄蕊发育有关，且和植物重瓣性状有一定关联。本实验通过研究石竹中的DichAG、DichSTK基因，探究其在石竹花发育过程中的作用及在不同器官中的表达模式，为探究石竹花型形成机理提供基础，为生产培育优良性状的石竹属新品种提供技术支持。主要结果如下：
　　1.石竹中AG亚家族中DichAG、DichSTK基因的克隆：克隆了石竹中DichAG、DichSTK基因，石竹DichAG开放阅读框为750 bp，编码249个氨基酸；DichSTK开放阅读框为699 bp，编码232个氨基酸。分别扩增石竹重瓣亲本CH和单瓣亲本DH的AGAMOUS基因的各内含子，并与日本的香石竹的序列进行比对。石竹的第3-6个内含子和香石竹的内含子在长度上有差异，第6个内含子比香石竹大1.2k，在3’多了一个1651bp的内含子，但两个亲本石竹间没有明显的差异；
　　2. DichAG、DichSTK基因的载体构建和遗传转化：构建了DichAG、DichSTK基因的超量表达载体和干涉载体。用这4个载体对石竹DH亲本的无菌苗进行转化，成功得到AG基因超量表达载体2棵转化阳性植株；
　　3. DichAG、DichSTK基因的表达分析：研究石竹重瓣亲本CH和单瓣亲本DH花苞的花萼、花瓣、雄蕊、雌蕊等四轮器官中DichAG、DichSTK基因的表达情况。结果发现DH亲本中在雄蕊和雌蕊中DichAG仍有较高表达量，但在CH亲本和DH亲本的其他部位DichAG在各个器官表达量较低。DichSTK在DH亲本的雌蕊中大量表达，而在DH亲本的其他部位和CH亲本的各个部位表达量几乎不表达。

目录

声明

第一章 前言

1.1 概述

1.2 AGAMOUS亚家族基因研究概况

1.3 AG基因内含子研究进展

1.4 本课题的目的和意义

第二章 石竹中DichAG、DichSTK基因的克隆

2.1.材料

2.2实验方法

2.3结果分析

2.4讨论

第三章 石竹DichAG、DichSTK基因超量表达、干涉表达载体的构建及遗传转化

3.1.材料和方法

3.2.实验方法

3.3 结果分析

3.4 讨论

第四章 DichAG、DichSTK基因在石竹花器官不同部位的表达探究

4.1实验材料

4.2实验方法

4.3 表达探究实验结果

4.4 讨论

参考文献

附录 实验中用到的所有引物

致谢