采后不同贮藏温度对‘锦绣’黄桃色泽的影响

摘要

桃是全球性重要的果树之一，‘锦绣’黄桃因其果实色泽亮丽、芳香宜人、富含营养而备受消费者青睐。采后色泽是影响桃品质的重要因素，但目前对桃果实采后色泽调控的研究甚少。桃的成熟期多集中于高温季节，温度在调控桃果实采后后熟过程中发挥着重要作用。为了探讨温度对果实采后色泽这一重要品质性状的影响，本研究以‘锦绣’黄桃为实验材料，研究了桃果实在低温(5℃)及不同货架期温度(15℃、25℃、35℃)贮藏下类胡萝卜素含量及其代谢途径相关基因的表达变化，以期为桃果实采后贮藏保鲜及色泽品质调控提供理论依据。主要结果如下:
　　1.利用高效液相色谱测定‘锦绣’黄桃果实采后贮藏过程中类胡萝卜素成分及其含量的变化，结果表明:果实采后主要类胡萝卜素组分为紫黄质、9-顺式-紫黄质、黄体黄质、β-胡萝卜素、叶黄质和β-隐黄质，果皮中类胡萝卜素的含量显著高于果肉;在低温贮藏过程中，桃果实果皮和果肉中类胡萝卜素总量均在贮藏前期升高，贮藏后期下降，果皮和果肉中总类胡萝卜素的积累高峰分别出现在贮藏第15d和第10d;在不同货架期温度下，果皮和果肉中类胡萝卜素的总量在整个贮藏期间持续增加。
　　2.选取转录组测序分析结果中4个表达稳定的基因和12个传统内参基因作为本研究的候选内参基因，用qRT-PCR方法及geNorm和NormFinder软件分别对各候选内参基因在桃“不同贮藏温度下的桃果实果皮样品组”、“不同贮藏温度下的桃果实果肉样品组”、“果实发育时期样品组”、“组织组”和“所有样品组”中的表达稳定性进行分析，结果表明PpeIF-1A和PpMUB6是最优内参基因，在不同样品组表达均稳定;而PpRPS28，PpRPT-5A和PpAKT3的表达不稳定，不适于用于桃qRT-PCR分析。
　　3.以Ppe IF-1A和PpMUB6为内参基因，对采后类胡萝卜素代谢相关基因进行定量分析，结果表明桃果实采后类胡萝卜素代谢仍受到转录水平调控，不同贮藏温度过程中桃果实类胡萝卜素代谢相关基因的表达趋势不同。在5℃贮藏过程中，PDS、ZDS和LCYB1的表达与果实果皮和果肉中总类胡萝卜素含量的变化趋势相一致;在25℃贮藏过程中，CRISTO的表达与果实果皮和果肉中总类胡萝卜素含量的变化趋势相一致;在35℃贮藏过程中，CRISTO、LCYB2a、LCYE和HYE的表达与果实果皮中总类胡萝卜素含量的变化趋势相一致，CRISTO和LCYE表达与果肉中总类胡萝卜素含量的变化趋势相一致。

目录

声明

摘要

缩略词表

1．前言

1．1 问题的提出

1．2 类胡萝卜素的生物学意义

1．3 植物类胡萝卜素的代谢研究

1．3．1 植物类胡萝卜素的生物合成

1．3．2 植物类胡萝卜素的裂解

1．4 桃类胡萝卜素的研究进展

1．5 桃果实采后低温贮藏的研究

1．6 内参基因的研究进展

1．7 本课题研究的意义

2 材料和方法

2．1 实验材料及样品的处理

2．2 实验方法

2．2．1 桃样品类胡萝卜素的提取及HPLC检测

2．2．2 RNA提取和cDNA合成

2．2．3 候选内参基因的选取

2．2．4 内参基因引物设计与合成

2．2．5 类胡萝卜素代谢相关基因引物设计

2．2．6 基因的克隆与测序

2．2．7 Real-time PCR检测和标准曲线的制备

2．2．8 数据分析

2．2．9 PpPSY1为目的基因验证内参基因的可靠性

3 结果与分析

3．1 ‘锦绣’黄桃果实采后贮藏过程中类胡萝卜素成分及含量的变化

3．1．1 ‘锦绣’黄桃果实在低温(5℃)贮藏过程中类胡萝卜素组分及含量的变化

3．1．2 ‘锦绣’黄桃果实果皮在不同货架期温度贮藏过程中类胡萝卜素组分和含量的变化

3．1．3 ‘锦绣’黄桃果实果肉在不同货架期温度贮藏期间类胡萝卜素组分和含量的变化

3．2 桃果实采后基因表达分析最佳内参基因的筛选

3．2．1 从RNA-Seq结果中筛选出潜在的内参基因

3．2．2 内参基因引物扩增效率和表达谱分析

3．2．3 geNorm软件分析内参基因的表达稳定性

3．2．4 NormFinder软件分析内参基因的表达稳定性

3．2．5 评价筛选内参基因的可靠性

3．3 类胡萝卜素代谢相关基因采后表达特性分析

3．3．1 ‘锦绣’黄桃果实在低温(5℃)贮藏过程中类胡萝卜素相关基因表达特性分析

3．3．2 ‘锦绣’黄桃果实果皮在不同货架期温度贮藏过程中胡萝卜素相关基因表达特性分析

3．3．3 ‘锦绣’黄桃果实果肉在不同货架期温度贮藏过程中胡萝卜素相关基因表达特性分析

4 讨论

4．1 关于桃qRT-PCR内参基因筛选的探讨

4．2 关于桃采后色泽变化的探讨

参考文献

附录

课题资助项目

致谢