淀粉样蛋白A和降钙素原对犬急性胰腺炎诊断作用的研究

摘要

犬急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)为一种急性消化系统疾病，由于其发病机制复杂、发病迅速，常导致犬死亡，但现阶段还未有能评估其严重程度和病情发展趋势的有效指标。而在人医方面已经能够凭借血清降钙素原(procalcitonin,PCT)和血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)的含量变化来准确评估病情严重程度和预后，在犬急性胰腺炎中还未有相关研究。研究犬急性胰腺炎病程发展过程中，白细胞、淋巴细胞及血清淀粉酶的变化情况，准确评估犬急性胰腺炎病情严重程度。同时探讨犬血清淀粉样蛋白A(SAA)和降钙素原(PCT)对犬急性胰腺炎病程发展的诊断作用，为临床诊断提供新的方法和参考提供依据。
　　本研究主要内容包括：⑴将2016年1月-2016年11月华中农业大学动物医院接收的39急性胰腺炎病犬作为自然发病组，进行流行病学调查和统计，收集病犬白细胞、淋巴细胞、血清淀粉酶数据资料，并分析其与急性胰腺炎变化的关系。在-20℃保存病犬血清，用ELISA方法统一检测血清降钙素原和淀粉样蛋白A的含量。此外，选取12只本地健康杂种犬，平均分为3组，A组为健康对照组，B组为水肿型急性胰腺炎组，C组为出血坏死型急性胰腺炎组。通过开腹手术向十二指肠小乳头内注入5％牛磺胆酸钠0.5ml/kg构建水肿型胰腺炎模型；将5%牛磺胆酸钠0.5ml/kg和3000U/mg/kg胰蛋白酶按体重计算后混合注入十二指肠小乳头，构建出血坏死型胰腺炎模型。于术前1h及术后第1d、2d、3d、4d、5d对3组试验动物采血，进行血常规和血液生化检测。于-20℃保存血清，通过ELISA方法统一检测3组试验动物血清淀粉样蛋白A和降钙素原的浓度变化。于7天后处死试验动物，摘取胰腺组织，进行HE染色。光镜下观察三组动物胰腺组织病理变化，评价胰腺损伤程度。⑵造模试验动物组结果显示，水肿型和出血坏死型AP犬白细胞在术后12h开始上升，在15h-40h之间水平较高，在36h-40h开始下降，且出血坏死组白细胞持续在较高水平的时间长于水肿组。淋巴细胞在发病后第1d,明显低于术前水平，第2d开始恢复术前范围。淀粉酶(amylase,AMYL)含量于术后第4d开始降至正常水平，且出血坏死组较水肿组恢复较慢。SAA和PCT在犬个体之间差异不显著，在无继发感染的急性胰腺炎病犬中变化不明显。HE染色结果显示，水肿组胰腺组织，腺泡间隙增大，但其外分泌结构大部分完好，而出血坏死组胰腺组织，腺泡破裂严重，导管结构基本消失，外分泌功能严重受损。⑶血清降钙素原及血清淀粉样蛋白A含量的变化在犬不同个体间差别较大，对于犬单个个体有临床意义,其含量随病情加重而增加，能动态指示AP病情变化；对无继发感染的犬AP和犬一过性AP无显著临床意义；对自然发病AP犬的病程发展及预后有诊断意义，其含量随病情加重而增加，随病情好转而降低。淋巴细胞降低,可提示犬AP处于发病初期。白细胞及淀粉酶持续处于高水平时间的长短，可提示犬AP病情严重程度。PCT、SAA与全血球计数及淀粉酶联合诊断，能更准确、更灵敏的评估犬AP病情的动态变化，为临床实践提供方法。

目录

声明

英文缩略词表

1前言

1.1研究背景

1.2文献综述

1.2.1犬急性胰腺炎

1.2.2降钙素原(Procalcitonin, PCT)

1.2.3淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)

1.3研究的目的意义及创新之处

2.1材料和仪器

2.1.1试验动物

2.1.2主要仪器设备

2.1.3主要试剂及耗材

2.1.4主要的溶液配制

2.2试验方法

2.2.1自然发病组

2.2.2 造模动物组

3.1自然发病组

3.1.1流行病学调查结果

3.1.2 影像学检查结果

3.1.3临床病例资料

3.2造模动物组

3.2.1犬急性胰腺炎模型构建结果

3.3.2各组试验动物体温变化情况

3.2.3造模动物相关血液指标变化

3.2.4 ELISA结果

3.2.5胰腺组织病理变化

4讨论

4.1自然发病组

4.2造模动物组

4.2.1 模型构建

4.2.2 AP犬WBC分析

4.2.3 AP犬AMYL分析

4.2.4 AP犬淋巴细胞分析

4.2.5 PCT及SAA与犬AP相关性分析

4.2.6胰腺病变分析

5结论

参考文献

附录

致谢