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荷叶铁线蕨ArsGID1基因的克隆和功能研究

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摘要

Abstract

1.前言

1.1.1蕨类植物简介

1.1.2蕨类植物组织培养研究进展

1.1.3蕨类植物再生体系研究进展

1.1.4农杆菌介导的植物遗传转化体系研究进展

1.1.5蕨类植物性别决定调控机制研究进展

1.1.6荷叶铁线蕨研究进展

1.2 GID1基因研究进展

1.2.1赤霉素通路的研究进展

1.2.2GID1研究概况

1.3课题的目的与意义

2.1前言

2.2.1植物材料

2.2.2生化试剂

2.2.3培养基

2.2.4所用仪器及设备

2.3.1荷叶铁线蕨原叶体诱导培养基的筛选

2.3.2抑菌剂对外植体生长的影响

2.3.3潮霉素筛选压的选择

2.4结果与分析

2.4.1荷叶铁线蕨再生体系的优化

2.4.2荷叶铁线蕨转化体系的优化

2.5.1外源激素对荷叶铁线蕨原叶体的影响

2.5.2外植体的选择对再生及遗传转化体系的影响

2.5.3合适的转化条件的调控

3.1前言

3.2研究所需材料

3.2.1植物材料、菌株及载体类型

3.2.2实验试剂

3.2.3实验所用仪器

3.2.4分析所用相关软件

3.3研究方法

3.3.1荷叶铁线蕨总RNA的提取

3.3.2荷叶铁线蕨RNA反转录

3.3.3荷叶铁线蕨基因组DNA的提取

3.3.4荷叶铁线蕨ArsGID1基因的克隆

3.4.1荷叶铁线蕨ArsGID1基因的克隆

3.4.2荷叶铁线蕨ArsGID1基因序列的开放阅读框分析

3.4.3ArsGID1基因编码氨基酸序列的同源性分析

3.4.4ArsGID1基因编码的蛋白质分析

3.5讨论

3.5.1荷叶铁线蕨ArsGID1基因的克隆

3.5.2荷叶铁线蕨ArsGID1编码的蛋白质

4.1前言

4.2研究所需材料

4.2.1植物材料以及载体

4.2.2实验试剂

4.2.3实验所用仪器

4.3研究方法

4.3.1荷叶铁线蕨ArsGID1基因重组载体的构建

4.3.2热激法导入农杆菌

4.3.3拟南芥的转化及阳性苗的鉴定

4.3.4荷叶铁线蕨的转化及阳性苗的鉴定

4.4.1荷叶铁线蕨ArsGID1基因双元表达载体的构建

4.4.2拟南芥转化实验结果

4.4.3荷叶铁线蕨转化实验结果

4.5讨论

5.展望

参考文献

附录

附录一

附录二

致谢

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