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蛋白裂解酶(matriptase)及其底物在猪胎盘褶皱发育中的调控作用研究

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摘 要

Abstract

缩略词表(Abbreviations)

1 前言

1.1 研究问题的由来

1.2文献综述

1.2.1 猪胎盘皱褶的功能及其发育过程

1.2.2 ST14基因及其编码蛋白matriptase在上皮源性肿瘤组织中的研究进展

1.2.3 ST14基因及其编码蛋白matriptase在上皮组织中表达

1.2.4 ST14及其编码蛋白matriptase调控胎盘发育的机制研究进展

1.2.5影响上皮细胞增殖迁移相关基因研究进展

1.2.5.1细胞外基质成分及功能

1.2.5.2 HAI-1和HAI-2基因

1.2.5.3 金属基质肽酶MMP家族

1.2.5.4蛋白酶激活受体 PAR2基因及TGF-β通路

1.2.5.5 蛋白裂解酶matriptase激活HGF/c-Met信号通路,调控细胞增殖

1.2.5.6 蛋白裂解酶matiptase调控小鼠胎盘迷路层的基底膜完整性

1.3 本研究的目的与意义

2 材料与方法

2.1本研究的技术路线

2.2材料

2.2.1实验样品

2.2.2 菌株和质粒

2.2.3 主要试剂

2.2.4主要溶液的配制

2.2.5主要仪器设备

2.2.6主要分子生物学软件和数据库

2.3 主要操作方法

2.3.1 动物组织总RNA的提取

2.3.2 cDNA的合成

2.3.3 ST14基因序列的确认

2.3.4石蜡组织切片制作

2.3.5石蜡切片的免疫组织化学

2.3.6蛋白质的提取及western blotting检测

3 结果

3.1 ST14基因的克隆及ST14编码的蛋白裂解酶matriptase在猪母胎界面的表达模式检测

3.1.1猪ST14基因两个转录本编码区的克隆

3.1.2蛋白裂解酶matriptase在猪胎盘褶皱表达模式及活性状态检测

3.1.2.1蛋白裂解酶(matriptase)在猪胚胎附植期胎盘中的表达模式检测

3.1.2.2蛋白裂解酶matriptase在猪妊娠中后期母胎界面胎盘褶皱的表达模式检测

3.1.2.3蛋白裂解酶matriptase在猪妊娠中后期胎盘中的活性状态检测

3.2基质金属肽酶在猪母胎界面胎盘褶皱的表达模式及活性检测

3.2.1基质金属肽酶1在猪母胎界面胎盘褶皱的表达模式及活性状态检测

3.2.1.1基质金属肽酶1( matrix metalloproteinase 1,MMP1)在猪

3.2.1.2 金属基质肽酶MMP1在猪妊娠中后期母胎界面胎盘褶皱的表达模式检测

3.2.1.3金属基质肽酶MMP1在猪妊娠中后期胎盘组织的活性状态检测

3.2.2 金属基质肽酶MMP3在猪妊娠不同时期胎盘中表达模式检测

3.2.2.1金属基质肽酶MMP3在猪胚胎附植期胎盘中的表达

3.2.2.2金属基质肽酶MMP3在猪妊娠中后期母胎界面胎盘褶皱的表达

3.3.1蛋白酶激活受体PAR2在猪妊娠不同时期胎盘褶皱的表达模式

3.3.2 PAR2在猪妊娠中后期胎盘组织的活性状态监测

3.4 HGF/c-Met信号通路成员c-Met在大白猪不同妊娠期胎盘褶皱的表达模式

3.5 基底膜成分IV型胶原和层粘连蛋白Laminin在大白猪妊娠

4 讨论

4.1 关于猪ST14基因两个转录本讨论

4.2 蛋白裂解酶matriptase及其底物在猪胚胎附植期母胎界面表达模式讨论

4.3 蛋白裂解酶matriptase及其底物在妊娠中后期母胎界面表达模式讨论

4.3.2 蛋白裂解酶matriptase介导TGF-β通路调控猪胎盘褶皱底部滋养层上皮细胞增殖迁移

4.3.3 MMP1与PAR2关系讨论

4.4 蛋白裂解酶matriptase直接降解基底膜成分调控猪胎盘褶皱发育

4.5 关于蛋白裂解酶matriptase与猪胎盘褶皱发育之间的潜在作用机制讨论

5 小结

5.1 本研究的主要结论和意义

(2)研究了蛋白裂解酶matriptase及其底物对猪胎盘褶皱发育的调控作用,发现

5.2 本研究的特色与创新点

参考文献

致 谢

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