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摘要
Abstract
缩略简表
第一章 文献综述
1 萝卜蚜
1.1 萝卜蚜的生物学特征
1.2 萝卜蚜的危害
1.3 萝卜蚜的抗药性
2昆虫RNAi研究进展
2.1 RNAi机制
2.1 RNAi与害虫防治
3 hunchback, Elp3和p300 / CBP基因的研究进展
3.1 hunchback基因的功能及其RNAi研究
3.2 组蛋白乙酰转移酶Elp3和p300 / CBP基因
4 研究目的及意义
5 论文设计
5.1研究内容
5.2技术路线
第二章 萝卜蚜转录组Unigene数据库构建和实时定量PCR内参基因筛选
1 前言
2 材料方法
2.1 供试昆虫
2.2 主要仪器与试剂
2.3 样品收集
2.4 Illumina测序和序列组装
2.5 Unigene功能注释
2.6 候选内参基因选择和引物设计
2.7 总RNA提取和cDNA合成
2.8 实时荧光定量PCR分析
2.9 候选内参基因表达稳定性分析
3 结果分析
3.1 Illumina测序和de novo组装
3.2 蛋白NR注释
3.3 基因聚类分析
3.4 候选内参基因的鉴定结果
3.5 qRT-PCR评估内参基因引物性能
3.6 内参基因的表达量鉴定
3.7 候选内参基因的稳定性分析
4 讨论
第三章 萝卜蚜间隔基因hunchback的功能及其RNAi研究
1 前言
2 材料方法
2.1 供试昆虫
2.2 主要仪器与试剂
2.3 萝卜蚜人工饲料的配制及人工饲养方法
2.4 萝卜蚜总RNA提取和第1链cDNA的合成
2.5 hunchback基因CDS序列的克隆
2.6 hunchback基因序列分析及系统发育树的构建
2.7 hunchback基因在萝卜蚜不同龄期的表达分析
2.8 RNAi介导的hunchback基因沉默对萝卜蚜存活率的影响
3 结果与分析
3.1 hunchback基因CDS序列的克隆及分析
3.2 hunchback基因在萝卜蚜不同龄期的表达分析
3.3 RNAi介导的hunchback基因沉默对萝卜蚜的影响
4 讨论
第四章 萝卜蚜组蛋白乙酰转移酶Elp3和p300 / CBP基因的功能及其RNAi研究
1 前言
2 材料方法
2.1供试昆虫
2.2主要仪器与试剂
2.3蛋白提取
2.4蛋白定量（BCA法）
2.5Western Blotting检测3龄有翅与无翅萝卜蚜
3 结果与分析
3.1 有翅与无翅萝卜蚜赖氨酸乙酰化修饰水平检测
3.2 Elp3和p300 / CBP基因CDS序列的克隆及分析
3.3 Elp3和p300 / CBP基因在萝卜蚜不同龄期的表达分析
3.4 RNAi介导的Elp3和p300 / CBP基因沉默对萝卜蚜的影响
4 讨论
第五章 总结与展望
1 总结
2 展望
参考文献
致谢
附录Ⅰ
