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EA体细胞杂种和MA体细胞杂种胞质遗传组成和病毒抗性以及结薯特性的鉴定

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摘要

缩略词表

1 前言

1.1 课题的提出

1.2 体细胞杂种的应用

1.2.1 马铃薯体细胞杂种在育种学上的应用

1.2.2 马铃薯体细胞杂种在遗传学上的应用

1.2.3 马铃薯体细胞杂种在基因组学上的应用

1.3 细胞质组成分析

1.4 马铃薯块茎发育的影响因素及基因

1.5 本研究的目的及意义

2 材料与方法

2.1 试验材料

2.2 试验方法

2.2.1 细胞质组成分析

2.2.1 病毒抗性鉴定

2.2.3 结薯表型鉴定

3 结果与分析

3.1 细胞质遗传组成分析

3.1.1 叶绿体引物和线粒体标记的筛选开发

3.1.2 体细胞杂种群体的胞质组成鉴定

3.1.3 聚类分析

3.2 EA体细胞杂种材料病毒抗性鉴定

3.3 EA体细胞杂种材料结薯特性分析

3.3.1 大棚种植试验

3.3.2 试管薯结薯试验

4 讨论

4.1 细胞质组成

4.2 体细胞杂种结薯特性分析

4.3 体细胞杂种病毒抗性鉴定

4.4 研究展望

参考文献

附录

致谢

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摘要

马铃薯野生种具有许多生物和非生物抗性,但它与栽培种之间由于胚乳平衡数和倍性差异,不能直接进行有性杂交,体细胞杂交技术能够克服有性杂交不亲和的障碍,为马铃薯野生种的利用提供了一条有效途径。
  本实验室前期利用二倍体不结薯野生种S.etuberosum(简称ETB)和栽培种双单倍体AC142融合,获得了93个体细胞杂种;利用二倍体野生种S.commersonii(简称MLM)和AC142融合获得51个体细胞杂种。野生种S.etubersoum具有多种病毒抗性,S.commersonii具有良好的直接和驯化抗寒性。为了利用这批体细胞杂种,本研究选择其中的整倍体材料(四倍体和六倍体),系统分析了S.etuberosum+AC142(EA体细胞杂种)的病毒抗性、结薯特性和胞质遗传组成,S.commersonii+AC142(MA体细胞杂种)的胞质遗传组成,以下是主要结果:
  1、细胞质遗传组成分析:用叶绿体和线粒体特异性引物对体细胞杂种的细胞质来源进行了分析,并根据体细胞杂种片段扩增差异进行聚类分析,结果表明部分体细胞杂种由双亲的线粒体基因组重组而成,叶绿体只有一个亲本的。其中,EA体细胞杂种叶绿体组成存在明显的偏向性,多数为AC142的叶绿体类型;MA体细胞杂种则不同,它的叶绿体类型没有明显的偏向性。
  2、EA体细胞杂种的病毒抗性鉴定:利用病毒接种鉴定方法,从37份体细胞杂种中筛选到7个PVY抗性材料:EA7-3,EA11-1,EA48-1,EA56-1,EA92-1,EA5-1和EA28-1,8个PVS抗性材料:EA11-1,EA48-1,EA56-1,EA92-1,EA5-1,EA49-1,EA53-1和EA88-1。2个PVX抗性材料:EA11-1和EA40-1。因融合亲本均有PVA抗性,所有体细胞杂种也均具有PVA抗性。
  3、EA体细胞杂种的结薯表型鉴定:分别于2016年上半年和2016下半年在温室大棚对体细胞杂种的结薯情况进行分析;在培养室进行试管薯试验。综合3次实验结果表明四倍体杂种都可以结薯,六倍体体细胞杂种结薯存在差异:部分结薯,部分不结薯,部分体细胞杂种有明显高于亲本的薯重。三次结薯试验的相关性分析表明,2016上半年结薯试验与下半年结薯试验有极显著的相关性,与试管薯结薯同样有极显著的相关性,而2016年下半年结薯试验与试管薯结薯没有相关性。

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