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柑橘致敏性评价方法建立及其引起人体不良反应机理研究

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摘要

缩略语表

第一章前言

1课题的提出

2食物不良反应研究进展

2.1食物不良反应的类型

2.2食物过敏反应的流行病学调查研究进展

2.3食物过敏反应的主要类型及症状

2.4食物过敏反应机理

2.5过敏原蛋白的命名规则

2.6过敏原检测方法

2.7鉴定新过敏原

3柑橘过敏研究进展

3.1柑橘过敏原研究进展

3.2过敏与花粉等过敏的交叉反应

3.3园艺产品中主要过敏原蛋白

3.4柑橘过敏原检测方法研究进展

3.5过敏原积累的调控机制

4与摄入温州蜜柑诱导“上火”相关的活性物质及炎症通路研究进展

4.1柑橘中抗炎相关的活性物质

4.2花生四烯酸代谢通路

5研究目的及内容

第二章开发和应用多重实时PCR评估柑橘类果实的过敏性

1.前言

2.材料和方法

2.1植物材料

2.2 RNA提取和cDNA合成

2.3设计引物和Taqman探针

2.4引物特异性测试

2.5 Taqman探针灵敏度和PCR扩增效率检测

2.6单重和多重荧光定量PCR的体系优化

2.7统计分析

3.结果与讨论

3.1引物和探针设计

3.2引物特异性

3.3多重荧光定量PCR体系的优化

3.4扩增效率和灵敏度分析

3.5成熟期和遗传因子对柑橘不同组织过敏原基因表达的影响

1前言

2材料和方法

2.1植物材料

2.2柑橘果实蛋白提取

2.3质粒构建

2.4柑橘重组过敏原蛋白的表达、纯化和鉴定

2.5兔多克隆抗体的制备

2.6柑橘过敏原人群血清

2.7聚丙烯凝胶电泳及免疫印迹

2.8数据分析

3结果与分析

3.1质粒构建

3.2柑橘过敏原融合蛋白的表达、纯化和鉴定

3.3多克隆抗体anti-Cit s 1.01,anti-Cit s 2.01和anti-Cit s3.01的特异性和有效性

3.4通过免疫印迹法比较不同柑橘品种中过敏原含量

3.5主成分分析评价柑橘致敏性

3.6甜橙过敏患者血清免疫印迹法验证柑橘致敏性

3.7柑橘过敏原mRNA和蛋白表达相关性分析

4讨论

第四章温州蜜柑通过花生四烯酸代谢途径诱导轻度炎症

1.前言

2.材料和方法

2.1温州蜜柑口腔激发实验及血常规分析

2.2多重细胞因子测定

2.3样品制备

2.4代谢物分析

2.5温州蜜柑与甜橙主要营养成分检测

2.6统计分析

3.结果与分析

3.1温州蜜柑致综合征的临床特征

3.2 SIS是一种免疫介导的食物不良反应

3.3 SIS对人群血液代谢物的影响

3.4关键代谢物与临床SIS的严重程度有关

3.5鉴定SIS的潜在生物标志物

4.讨论

第五章总结与展望

1全文总结

2进一步工作展望

参考文献

在读期间的科研实践

致谢

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