声明
摘要
缩略语
1研究的背景
2植物多酚调节脂质代谢的作用机制研究进展
3细胞膜脂质筏对细胞生长分化至关重要的作用
4植物多酚与细胞膜脂质筏相互作用的研究进展
5植物多酚与细胞膜脂质筏上的67LR的作用机制研究进展
6本研究的目的意义及主要内容
6．1本研究的目的与意义
6．2技术路线
6．3本研究的主要内容
6．4本研究的创新点
第二章柿单宁四种特征结构单元与前脂肪细胞3T3-L1细胞膜相互作用的比较研究
前言
1材料与方法
1．1实验材料和仪器设备
1．2实验方法
2结果与分析
2．2扫描电子显微镜(SEM)探究柿单宁主要特征单元对前脂肪细胞313-L1细胞膜表观形态的影响
2．3超高分辨率扫描电镜(Super high resolution SEM)探究柿单宁主要特征单元对前脂肪细胞3T3-L1细胞膜表面形态的影响
2．4原子力显微镜(AFM)探究柿单宁主要特征单元对前脂肪细胞3T3-L1细胞膜表面形貌的影响
2．5柿单宁主要特征单元对前脂肪细胞3T3-L1细胞膜物化性质的影响
2．6柿单宁主要特征单元的分子结构以及性质分析
3讨论
4小结
第三章采用体外合成DPPC脂质体探究柿单宁特征单元与细胞膜的相互作用
前言
1．实验材料和方法
1．1实验材料和仪器设备
1．2实验方法
2结果与分析
2．1 DPPC脂质体粒径分布
2．2四种二聚体猝灭DPPC脂质体中探针DPH，TMA-DPH，NBD-PE荧光的剂量、时间效应关系
2．3四种二聚体对DPH／DPPC荧光脂质体中猝灭作用
2．4四种二聚体猝灭DPPC荧光脂质体的猝灭机制
2．5四种二聚体在DPPC脂质体中的分布
2．6四种二聚体对DPPC脂质体的流动性的影响
2．7四种二聚体对前脂肪细胞3T3-L1细胞膜流动性的影响
3讨论
4小结
第四章采用分子动力学模拟(MD)研究柿单宁特征结构单元与磷脂双分子层的相互作用
1材料与方法
1．2二聚体分子的结构优化以及力场生成
1．3分子动力学模拟
1．4数据分析
2．结果与分析
2．1系统RMSD的计算
2．2小分子质心在模拟过程中的变化
2．3二聚体分子在磷脂双分子层上的结合构像
2．4二聚体与磷脂双分子层在模拟过程中形成的氢键分析
2．5二聚体与单独磷脂氧原子形成的氢键分析
2．6磷脂双分子层与二聚体上的单独羟基形成的氢键分析
2．7二聚体与磷脂膜的结合自由能
2．8结合自由能分解
2．9二聚体对磷脂膜结构以及性质的影响
3讨论
4小结
第五章柿单宁特征结构单元通过结合细胞膜脂质筏胆固醇抑制小鼠前脂肪细胞3T3-L1的成脂分化
前言
1材料与方法
1．1实验材料和仪器设备
1．2实验方法
2结果与分析
2．1四种二聚体对“类脂质筏”脂质体的荧光猝灭和结合常数
2．2脂质结合试剂对前脂肪细胞3T3-L1增殖活力以及膜胆固醇的影响
2．3脂质筏胆固醇干扰试剂对3T3-L1细胞脂质积累的影响
2．4脂质筏胆固醇结合试剂抑制MDI诱导的细胞增殖而不影响对数期细胞生长
2．5脂质筏胆固醇结合试剂β-MCD，Filipin阻碍3T3-L1分化早期阶段的MCE进程
2．6脂质筏胆固醇结合试剂降低3T3-L1分化过程中与分化相关的基因和蛋白的表达
2．7柿单宁结构单元A-ECG dimer，A-EGCG dimer协同脂质筏胆固醇结合试剂β-MCD抑制前脂肪细胞3T3-L1分化
2．8柿单宁结构单元破坏3T3-L1细胞膜脂质筏结构
2．9柿单宁结构单元降低细胞膜脂质筏胆固醇含量
2．10柿单宁结构单元通过多重氢键结合膜胆固醇
2．11 Optiprep密度梯度超高速离心分离脂质筏以及受体活化检测
3讨论
4小结
第六章柿单宁特征结构单元A-ECG dimer和A-EGCG dimer抑制小鼠前脂肪细胞3T3-L1成脂分化与脂质筏受体67Kda Laminin Receptor (67LR)的相依性关系
前言
1材料与方法
1．1实验材料和仪器设备
1．2实验方法
2结果与分析
2．1 Insulin诱导的蛋白活化时效以及量效关系
2．2柿单宁主要特征单元对前脂肪细胞3T3-L1胰岛素信号通路的剂量、时间-效应关系
2．3 67LR在3T3-L1细胞分化进程中的表达规律
2．4柿单宁主要特征单元A-EGCG dimer通过67LR抑制细胞增殖和有丝分裂周期进程
2．5柿单宁主要特征单元A-EGCG dimer通过67LR阻碍3T3-L1分化的胰岛素信号通路
2．6柿单宁主要特征单元A-ECG dimer干扰3T3-L1细胞周期和抑制增殖不依赖于67LR
2．7柿单宁主要特征单元A-ECG dimer抑制3T3-L1的分化不依赖于67LR
2．8分子对接验证二聚体以及EGCG与67LR的相互作用
2．9分子对接预测A-ECG dimer与脂质筏上胰岛素受体(IR)的相互作用
3讨论
4小结
第七章结论与展望
参考文献
附录
读博期间发表的论文和获得的奖励
读博期间参加的学术会议
致谢
