声明
摘要
缩略语表
1前言
1．1羊肚菌概述
1．1．1羊肚菌生物学特性
1．1．2羊肚菌的生态学意义及营养经济价值
1．1．3羊肚菌的现代分子生物学研究
1．2重金属污染现状
1．3重金属镉胁迫对生物体的影响
1．4酵母中的重金属镉脱毒机制研究
1．5植物中的重金属镉脱毒机制研究
1．6食用菌中的重金属镉脱毒机制研究
1．7铜伴侣蛋白ATX1研究进展
1．8本研究的目的和意义
2材料与方法
2．1试验材料
2．1．1供试菌株
2．1．2主要试剂
2．1．3主要仪器
2．1．4供试培养基
2．1．5引物信息
2．2实验方法
2．2．1外源添加不同浓度镉对羊肚菌长速的影响
2．2．2羊肚菌镉胁迫响应基因筛选及MiATX1蛋白结构分析
2．2．3农杆菌介导的羊肚菌遗传转化体系的建立
2．2．4 MiATX1基因功能验证
3结果与分析
3．1外源添加不同浓度重金属镉对梯棱羊肚菌单孢菌株A50长速的影响
3．2镉离子胁迫下侯选基因表达水平分析
3．3梯棱羊肚菌ATX1(MiATX1)蛋白结构和同源性分析
3．4农杆菌介导的羊肚菌遗传转化体系构建
3．4．1载体p1391-u-gus的构建
3．4．2转化子初步筛选
3．4．3转化子Southern杂交
3．4．4转化子荧光观察
3．4．5转化子GUS染色观察
3．5 MiATX1基因RNAi干扰
3．5．1 RNAi载体构建
3．5．2 RNAi转化子筛选
3．5．3干扰转化子镉敏感性测试
3．6 MiATX1基因超表达
3．6．1超表达载体构建
3．6．2超表达转化子筛选
3．6．3超表达转化子镉敏感性测试
4讨论
4．1农杆菌介导的羊肚菌遗传体系的评估
4．2梯棱羊肚菌MiATX1基因沉默和超表达效果的评价
4．3 MiATX1在梯棱羊肚菌镉代谢中发挥的作用
4．4总结与展望
参考文献
附录
致谢
