声明
摘要
缩略语表(Abbreviation)
第1章文献综述
1．1．1流行病学
1．1．2临床症状与治疗
1．1．3狂犬病病原学特性
1．1．4 RABV复制周期
1．2．1中和抗体
1．2．2神经炎症
1．2．3血脑屏障通透性
1．3模式识别受体
1．3．1天然免疫模式识别受体
1．3．2模式识别受体介导的信号通路
1．3．3 Toll样受体
1．3．4 RIG-I样受体
1．3．5 PRRs与RABV
1．3．6 TLR7与适应性免疫
1．4体液免疫
1．4．1 B细胞的分化
1．4．2早期抗体的形成
1．4．3生发中心反应
第2章研究目的与意义
第3章材料与方法
3．1实验材料
3．1．1实验动物和细胞
3．1．2病毒
3．1．3试剂
3．1．4抗体
3．1．5实验仪器
3．2实验方法
3．2．1骨髓来源的pDC的分离培养及刺激
3．2．2 ELISA
3．2．3攻毒和免疫实验
3．2．4实时荧光定量RT-PCR
3．2．5免疫印迹
3．2．6 RNA测序及结果分析
3．2．7病毒毒价滴定
3．2．8 Trans-well检测bEND．3细胞通透性改变
3．2．9细胞免疫荧光
3．2．10 NaF检测体内血脑屏障通透性
3．2．11脑组织取材、固定和脑切片制作
3．2．12 HE染色及CD45免疫组化
3．2．13抗病毒中和抗体滴定
3．2．14流式细胞术
3．2．15淋巴结冰冻切片及免疫荧光染色
3．2．16 ELISpot
3．2．17数据分析
第4章结果与分析
4．1 TLR7对RABV致病性的影响
4．1．1 TLR7在pDC中识别RABV的感染
4．1．2肌肉感染时TLR7对RABV致病性的影响
4．1．3脑内感染时TLR7对RABV致病性的影响
4．1．4脑内感染时TLR7下游天然免疫信号通路激活情况
4．1．5脑内感染时RNA-seq检测脑内基因的变化情况
4．1．6 TLR7对RABV感染后血脑屏障通透性改变的影响
4．1．7 TLR7对感染小鼠脑内炎症及病变的影响
4．2 TLR7对RABV免疫原性的影响
4．2．1 TLR7对RABV感染后中和抗体产生的作用
4．2．2 TLR7对RABV感染后生发中心的形成的影响
4．2．3 TLR7对RABV免疫后Tfh细胞分化、GC B细胞招募的影响
4．2．4 TLR7对抗体的产生及PCs、ASCs形成的作用
4．2．5 TLR7对体液免疫的长期维持的作用
4．2．6 TLR7对记忆B细胞的形成和再次免疫反应的作用
4．2．7 TLR7对Th1型免疫反应的影响
第5章讨论与结论
5．1讨论
5．1．1 TLR7对致病性RABV的抑制作用
5．1．2 TLR7如何增加RABV感染引起的脑内炎症和损伤
5．1．3 TLR7如何促进抗体生成
5．1．4 TLR7提高RABV免疫原性的应用
5．2结论
参考文献
附录
致谢
