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【6h】

玫瑰MYB转录因子调控类黄酮介导的逆境响应机制研究

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摘要

缩略名词表

1.前言

1.1研究背景

1.2植物抗逆研究进展

1.2.1植物对逆境的响应

1.2.2 MYB转录因子与植物逆境响应

1.2.3类黄酮与植物抗逆

1.3类黄酮合成代谢研究进展

1.3.1类黄酮种类及结构

1.3.2类黄酮的合成途径

1.3.3环境因子对类黄酮合成的影响

1.3.4 MYB转录因子对类黄酮合成的调控

1.4玫瑰等蔷薇属植物抗逆及类黄酮代谢研究进展

1.5本研究的目的与意义

2.材料与方法

2.1植物材料与生长条件

2.2玫瑰转录组测序分析及MYB转录因子预测

2.3基因进化树构建及基因登录号

2.4玫瑰机械损伤、甲基紫精和光照处理

2.5实时荧光定量PCR分析

2.6 RrMYB5和RrMYB10基因分离和载体构建

2.7亚细胞定位分析

2.8酵母双杂交分析

2.9荧光素酶互补实验分析(Split-luciferase complementation assays)

2.10双荧光素酶报告基因实验(Dual luciferase reporter assay)

2.11玫瑰和烟草遗传转化

2.12月季花瓣瞬时转化

2.13 花青素和原花青素含量测定

2.14转基因烟草转录组测序分析

2.15转基因玫瑰氧化处理

2.16转基因烟草氧化处理和失水处理

3.结果与分析

3.1机械损伤的玫瑰叶片和花瓣中类黄酮物质及相关酶基因表达检测和MYBs基因表达分析

3.2玫瑰RrMYB5和RrMYB10基因分离

3.3 RrMYB5和RrMYB10基因时空表达

3.4 RrMYB5和RrMYB10亚细胞定位及蛋白互作分析

3.5 RrMYB5和RrMYB10激活类黄酮合成相关基因表达分析

3.6RrMYB5和RrMYB10转化玫瑰体细胞胚及瞬时转化月季花瓣分析

3.7 RrMYB5和RrMYB10转化烟草分析

3.8 RrMYB10、RrDFR和RrANR转基因烟草转录组数据分析

3.9 RrMYB5和RrMYB10转基因玫瑰幼苗抗氧化分析

3.10 RrMYB5、RrMYB10、RrDFR和RrANR四种转基因烟草植株抗氧化分析

4.讨论

4.2 RrMYB5和RrMYB10调控类黄酮合成

4.3 RrMYB5和RrMYB10相互作用,相互激活对方表达并且激活下游类黄酮合成相关结构基因的表达

4.4 RrMYB10、RrDFR和RrANR转基因烟草转录组分析

4.5 RrMYB5和RrMYB10基因超量表达促进转基因玫瑰和烟草中类黄酮的积累并提高植物的抗氧化性

5.结论

6.研究展望

参考文献

附录

致谢

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