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摘 要
Abstract
第1章 绪 论
1.1 课题背景及研究的目的和意义
1.2表观遗传学简介及相关进展
1.3 RNA m6A甲基化简介
1.4 RNA m6A甲基化研究进展
1.4.1 FTO去甲基化酶的研究进展
1.5 CRISPR-Cas9基因编辑技术
1.6 技术路线及主要研究内容
1.6.1主要研究内容
1.6.2 技术路线
第2章 实验材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验菌株，载体，细胞系及组织样品
2.1.2 实验试剂及仪器
2.1.3 实验分析软件及网站
2.2 实验方法
2.2.1 细胞水平实验
2.2.2 细胞总RNA的提取
2.2.3 Me-RIP实验
2.2.4 Dot Blot
2.2.5 RNA的反转录
2.2.6 实时荧光定量PCR
2.2.7 基因组DNA的提取
2.2.8 Western Blot实验
2.2.9 Cas9敲除载体的构建、转化和阳性克隆筛选
2.2.10 pcDNA3.0载体的构建
2.2.11质粒的提取与纯化
第3章FTO基因敲低和过表达细胞系的构建
3.1 引言
3.2五种m6A相关的酶表达检测
3.3 CRISPR-Cas9-FTO敲低载体的构建
3.4 pcDNA3.0过表达载体的构建及检测
3.5 讨论
3.6 本章小结
第4章 m6A去甲基化酶FTO下游基因鉴定
4.1 引言
4.2 FTO下游基因及下游基因m6A位点的筛选及鉴定
4.3 讨论
4.4 本章小结
结 论
参考文献
哈尔滨工业大学学位论文原创性声明和使用权限
致 谢
