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【6h】

乳香提取物对SD大鼠周围神经损伤后修复及GAP-43表达的影响

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摘要

1 引言

1.1 周围神经的概述

1.1.1 周围神经的概念

1.1.2 周围神经损伤部位的生理变化

1.2 周围神经损伤的分类和主要疗法

1.2.1 周围神经损伤的分类

1.2.2 周围神经损伤的主要疗法

1.3 促进周围神经再生的常见药物

1.3.1 神经生长因子

1.3.2 神经节苷脂

1.3.3 神经妥乐平

1.3.4 中药治疗周围神经损伤

1.4 生长相关蛋白GAP-43与周围神经损伤再生

1.4.1 GAP-43的分布

1.4.2 GAP-43在周围神经再生中的作用

1.5 雪旺细胞与周围神经修复

1.5.1 雪旺细胞的概述

1.5.2 雪旺细胞与周围神经损伤

1.6 乳香的化学成分及药理作用

1.6.1 乳香的化学成分

1.6.2 乳香的药理作用

2 试验材料与方法

2.1 试验材料

2.1.1 试验动物

2.1.2 试验试剂

2.1.3 试验仪器

2.1.4 主要试剂的配制

2.2 试验方法

2.2.1 试验技术路线图

2.2.2 试验分组

2.2.3 模型的建立

2.2.4 给药方法

2.2.5 标本的采集

2.2.6 观察指标及方法

2.2.7 统计方法

3 试验结果

3.1 一般情况观察

3.2 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后SFI的影响

3.3 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后腓肠肌湿重的影响

3.4 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后修复的组织学评估

3.5 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后GAP-43表达的影响

3.6 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后S100表达的影响

4 讨论

4.1 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后SFI的影响

4.2 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后腓肠肌湿重的影响

4.3 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后GAP-43表达的影响

4.4 乳香提取物对大鼠坐骨神经损伤后S100表达的影响

5 结论

致谢

参考文献

附录

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摘要

周围神经是指中枢神经(脑和脊髓)以外的神经,承担多种生理功能,一旦其受到外界直接或间接创伤而发生损伤,则会导致躯干和肢体的运动、感觉及自主神经功能障碍,严重影响机体的正常生活。由于目前周围神经损伤临床上较难恢复,因此周围神经损伤的修复一直是临床难题之一。本课题以乳香提取物为试验药物,以大鼠坐骨神经损伤为动物模型,研究了乳香提取物对周围神经损伤修复的作用及机制,为开发天然药物治疗周围神经损伤提供理论基础和试验依据。
  试验将96只SD大鼠(雌雄各半)制作坐骨神经挤压伤模型。将模型随机平均分为四组:模型对照组、乳香高剂量组、乳香中剂量组、乳香低剂量组。术后每日一次灌服乳香提取物,通过计算坐骨神经功能指数、腓肠肌湿重评估坐骨神经损伤后神经功能的恢复情况;免疫印迹法检测GAP-43的相对表达量;HE染色观察坐骨神经损伤后的组织恢复情况;免疫组化法检测S100的表达考察其对雪旺细胞增殖的作用。
  结果显示:(1)造模后7、14、21和28天,所有组SFI均表现出坐骨神经功能逐渐恢复的趋势;造模后7天,各组间SFI无显著差异,在造模后14和21天,乳香提取物高剂量组SFI明显提高(p<0.05),乳香提取物中剂量组和低剂量组与对照组相比无显著差异。28天,与对照组相比乳香提取物中剂量组和高剂量组大鼠SFI明显提高(p<0.05)。低剂量组在各时间点上与对照组相比均无显著差异。(2)各组腓肠肌恢复率均随时间而下降,其中模型对照组下降幅度最大。用药7、14天,乳香高剂量组腓肠肌恢复率明显高于对照组(p<0.05),低、中剂量组与对照组无显著差异。用药后21、28天,乳香中、高剂量组腓肠肌恢复率与对照组相比具有极显著差异(p<0.01),低剂量组与对照组相比无显著差异。上述结果提示乳香提取物能改善坐骨神经损伤后功能的恢复。(3)术后28天,HE染色可观察到a模型组:损伤部位纤维组织连接,髓鞘局部崩解,泡沫形成,梭形细胞增生;b乳香提取物低剂量组:神经损伤部位可见纤维组织填充,临近的神经纤维轴索变性,髓鞘崩解,雪旺细胞增殖;c乳香提取物中剂量组:可见较多雪旺细胞,髓鞘崩解成灶状;d乳香高剂量组:雪旺细胞增生明显。组织学评估显示乳香提取物能促进损伤的坐骨神经愈合。(4)造模后7天,各试验组与对照组相比GAP-43表达量均无显著差异。但在造模后14,21和28天,乳香提取物高剂量组GAP-43的表达明显高于对照组(p<0.05)。28天,与对照组相比,乳香提取物中、高剂量组GAP-43表达均明显升高(p<0.01)。各时间点低剂量组GAP-43表达量与对照组相比无显著差异。说明乳香提取物能上调坐骨神经损伤后GAP-43的表达量。(5)在术后7、14、21和28天,乳香提取物中、高剂量组S100的表达量明显高于对照组(p<0.01),乳香提取物低剂量组与对照组相比无显著差异。提示乳香提取物能促进坐骨神经损伤后雪旺细胞的增殖。
  综上所述,乳香提取物能够有效促进坐骨神经损伤后的修复,其机制可能是在坐骨神经受到损伤后,乳香提取物能够改善坐骨神经功能,提高GAP-43的表达量并且能够促进雪旺细胞增殖。

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