声明
摘要
1引言
1．1影响蜜蜂健康的因素
1．2蜜蜂病毒研究概括
1．3中华蜜蜂囊状幼虫病
1．4中蜂囊状幼虫病检测
1．5蜜蜂囊状幼虫病的防制
1．6本研究的目的和意义
2材料与方法
2．1实验材料
2．1．1病毒及实验用动物
2．1．2主要试剂
2．1．3主要仪器
2．1．4主要溶液的配制
2．2实验方法
2．2．1目的蛋白抗原性比较
2．2．2单克隆抗体制备
2．2．3 CSBV双抗夹心ELISA抗原检测试剂盒的研制
3结果与分析
3．1抗原性比较结果
3．1．2目的基因VP2-P-VP1和VP2-VP4-VP1的克隆结果
3．1．3重组表达质粒的构建表达及纯化
3．1．4小鼠血清抗体效价
3．1．5淋巴细胞增殖指数结果
3．1．6 IgY效价结果
3．1．7 IgY中和试验结果
3．2单克隆抗体制备结果
3．2．1免疫小鼠血清抗体水平
3．2．2杂交瘤细胞株的建立和筛选
3．2．3腹水的制备和效价的测定
3．2．4单克隆抗体的亚型鉴定结果
3．2．5腹水型单克隆抗体纯化结果
3．2．6单克隆抗体鉴定结果
3．2．7单克隆抗体中和试验结果
3．3双抗夹心ELISA检测试剂盒的研制
3．3．1单克隆抗体配对实验结果
3．3．2双抗夹心ELISA检测方法建立
3．3．3双抗夹心ELISA检测方法特异性验证结果
3．3．4双抗夹心ELISA检测方法敏感性结果
3．3．5双抗夹心ELISA检测方法重复性试验结果
3．3．6双抗夹心ELISA结果与RT-PCR结果的符合率检测
3．3．7双抗夹心ELISA检测试剂盒的组装及稳定性检测
4讨论
4．1重组结构蛋白抗原性比较
4．2单克隆抗体的制备
4．3双抗夹心ELISA试剂盒的研制
5结论
致谢
参考文献
攻读博士学位期间发表的学术论文
