人血浆中匹卡米隆和氢氯噻嗪定量分析方法研究和应用

摘要

目的:分别建立快速、灵敏、选择性强的液相色谱-串联质谱分析方法,测定人血浆中匹卡米隆和氢氯噻嗪的浓度,并分别应用于其药物动力学研究。方法:100μL含匹卡米隆的人血浆样品中加入内标对乙酰氨基酚,经沉淀蛋白处理后,以甲醇-10 mmol·L-1醋酸铵水溶液-甲酸(55:45:0.1,v/v/v)为流动相,采用Venusil ASB C18柱分离；检测采用三重四级杆串联质谱仪(配备有大气压化学电离源),以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z209→m/z(78+106)(匹卡米隆),m/z152→m/z(93+110)(内标,对乙酰氨基酚)。200μL含氢氯噻嗪的人血浆样品中加入内标甲氯噻嗪,经液-液萃取处理后,以甲醇-5 mmol·L-1醋酸铵水溶液-1％氨水(55:45:0.1,v/v/v)为流动相,采用Venusil ASB C18柱分离；检测采用三重四级杆串联质谱仪(配备有电喷雾电离源),以选择反应监测(SRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z296→m/z(205+269)(氢氯噻嗪),m/z358→m/z322(内标,甲氯噻嗪)。药动学参数计算采用非室模型。结果:匹卡米隆和氢氯噻嗪测定方法的线性范围分别为1.00～5000 ng/mL,和0.500～300ng/mL。日内、日间精密度均小于15％,准确度在±15％以内。每个样品测试时间均小于5 min。应用上述方法分别研究了健康受试者单次口服50 mg,100mg,200 mg匹卡米隆,以及连续5天每日3次,每次口服50 mg匹卡米隆的药物动力学性质；健康受试者口服12.5 mg,25 mg氢氯噻嗪后的药物动力学性质。结论:本文所建立的两种液相色谱-串联质谱定量分析方法选择性强,灵敏度高,操作简便,分别适用于匹卡米隆和氢氯噻嗪的临床药物动力学研究。

目录

文摘

英文文摘

1 引言

1.1 匹卡米隆研究背景介绍

1.2 氢氯噻嗪研究背景介绍

2 液相色谱-串联质谱法测定人血浆中匹卡米隆

2.1 分析方法建立

2.1.1 仪器

2.1.2 条件选择

2.1.3 确立的分析方法

2.2 分析方法确证

2.2.1 方法的选择性

2.2.2 标准曲线和定量下限

2.2.3 方法精密度与准确度

2.2.4 样品处理回收率

2.2.5 样品的稳定性

2.2.6 基质效应考察

2.3 分析方法在药动学研究中的应用

2.3.1 受试者的选择

2.3.2 药品及来源

2.3.3 给药方案与样品采集

2.3.4 受试者血浆样品测定

2.3.5 血药浓度数据

2.3.6 数据处理

2.3.7 药动学结果

2.4 讨论

3 液相色谱-串联质谱法测定人血浆中氢氯噻嗪

3.1 分析方法建立

3.1.1 仪器

3.1.2 条件选择

3.1.3 确立的分析方法

3.2 分析方法确证

3.2.1 方法的选择性

3.2.2 标准曲线和定量下限

3.2.3 方法精密度与准确度

3.2.4 样品提取回收率

3.2.5 样品的稳定性

3.2.6 基质效应考察

3.3 分析方法在药动学研究中的应用

3.3.1 受试者的选择

3.3.2 药品及来源

3.3.3 给药方案与样品采集

3.3.4 受试者血浆样品测定

3.3.5 血药浓度数据

3.3.6 数据处理

3.3.7 药动学结果

3.4 讨论

4 实验部分

4.1 药品与试剂

4.2 溶液配制

4.3 仪器与设备

5 结论

参考文献

致谢

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