经肝动脉骨髓干细胞移植治疗肝硬化的临床应用研究

摘要

背景和目的：肝硬化是临床常见病,尤其是乙型肝炎性肝硬化及酒精性肝硬化,进入失代偿期后逐渐发展,最终可能导致肝功能衰竭。原位肝移植是目前治疗终末期肝病的最理想方法,但缺乏供体、手术费高昂和长期使用免疫抑制剂等因素阻碍了其推广。目前,干细胞研究已在医学领域取得了令人瞩目的成就,也为终末期肝病的治疗提供了新思路。作者对15例肝硬化失代偿期患者进行了自体骨髓干细胞移植治疗。在无菌条件下,患者行局部麻醉消毒,在X光透视下,经股动脉插管至肝固有动脉,将分离好的骨髓干细胞悬液注入肝内。观察发现,在移植2——4周后,ALT逐渐降低,TBIL逐渐下降,ALB逐渐升高,PTA不同程度升高,胆碱脂酶活力升高,胆固醇升高。表明骨髓干细胞移植治疗后,患者肝脏功能明显改善。作者还观察了自体骨髓干细胞移植后患者临床症状的变化,发现移植后大多数患者有明显的改善。15例移植患者均未发现严重不良反应及并发症。本组对失代偿期肝硬化患者采用自身骨髓单个核细胞经肝动脉途径移植的方法进行治疗,取得了一定的疗效。
　　 材料与方法：
　　 1.标本来源2007年11月—2009年9月期间收治15例失代偿期肝硬化患者,其中男12例,女3例,年龄26～53岁,平均42岁。10例为慢性乙型肝炎后肝硬化,5例酒精性肝硬化。Child-Pugh分级:A级2例,B级5例,C级8例。术前均行腹部B超检查及CT检查。实验室检验包括血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)、凝血酶原时间(PT)及活动度(PA)。所有病例入院后均行内科对症治疗。
　　 2.移植方法移植术当日抽取患者自体骨髓200ml。用密度梯度离心法分离出骨髓单个核细胞,每例患者提取的骨髓干细胞总数均在2×108以上,置于20ml生理盐水中,在37℃恒温下保存于无菌瓶内,4小时内进行骨髓单个核细胞移植术。经股动脉穿刺插管,先行选择性肝固有动脉造影.将含有骨髓单个核细胞的生理盐水稀释至50ml后经导管缓慢注入。
　　 3.疗效观察术后观察临床症状、体征,术后1周、2周、1个月、2个月、6个月、1年分别复查肝功能、PT、PA和B超、CT。根据临床症状、体征和实验室检查结果,初步将患者疗效分为:有效(临床症状、体征改善≥2项,实验室检查指标好转≥2项),无效(临床症状和体征没有改善或仅有1项改善,实验室检查指标无好转或仅有1项好转),恶化(临床症状或体征加重,实验室检查指标持续异常)。
　　 4.统计学处理所有数据均经SPSS(10.0版)统计软件进行统计学分析。统计数据用-x±s表示,首先对资料进行正态及方差齐性检验。以a=0.05为显著性检验水准。
　　 结果：
　　 1.血管造影所见15例肝动脉造影,均有肝脏体积缩小、肝动脉卷发样纡曲等肝硬化典型表现。术前CT、B超未发现肝内占位,AFP阴性。2例乙型肝炎后肝硬化失代偿期患者,经股动脉插管肝总动脉造影。显示肝总动脉分支正常,导管端置于肝总动脉灌注干细胞悬液(图1,2)。
　　 2.骨髓干细胞介入术后术后不同时间检测肝功能相关指标结果见表1,表2。
　　 3.术后随访2月显示13例有效,2例无效,无1例恶化。随访1年显示8例有效患者中3例效果显著者均为酒精性肝硬化,3例酒精性肝硬化患者例骨髓干细胞肝内移植前后相关指标检测结果见表3,表4。
　　 4.所有病例术后均未出现发热、过敏反应及其他不适。10例乙型肝炎后肝硬化,5例酒精性肝硬化,治疗前有明显乏力、纳差、尿黄症状及中度腹水。自体骨髓干细胞移植术后2个月,临床症状基本消失,B超显示仅少量腹水。
　　 结论：
　　 1.骨髓干细胞移植治疗能改善肝功能。
　　 2.骨髓干细胞移植是治疗肝硬化的有效方法。