毛细管电泳富集技术用于蛋白质和农药残留的高灵敏检测

摘要

毛细管电泳(CE)是集电泳和液相色谱特性于一体的新型分离分析技术，具有高效、快速、试样用量少等优点。胶束电动色谱(MEKC)作为CE较常用的分离模式，能同时实现带电粒子、中性物质和强疏水性物质的分离，具有很好的应用前景。但CE存在灵敏度低的缺点，一般通过采用在线和非在线富集技术提高灵敏度。扫集(sweeping)是MEKC模式中常用的在线富集技术，操作简单，富集效率高。
　　分散液液微萃取(DLLME)是近期颇受关注的样品前处理技术，摒弃了传统技术操作繁琐、费时、费力、试剂耗费量大、污染环境等缺点，具有很高的灵活性。本文将DLLME、sweeping技术与MEKC结合，在查阅大量文献的基础上，完成了以下工作:
　　1.建立了在线扫集-胶束毛细管电动色谱法检测阿尔茨海默病早期诊断标志物Aβ1-42的有效方法。采用未涂层熔融石英毛细管;检测波长为192nm，运行缓冲液为15mmol/L硼砂-20mmol/LSDS，pH=9.3，分离电压5kV，50mbar下压力进样60s时富集效果最佳。在最优条件下，Aβ1-2总浓度的检出限为0.08μmol/L，血清样品加标回收率为89.2％～98.5％，RSD小于6％。
　　2.建立了分散液液微萃取-在线扫集-胶束毛细管电动色谱法分离检测蔬菜中的三嗪类除草剂（嗪草酮、环嗪酮、氰草津、扑草净）残留的高效方法。毛细管为未涂层熔融石英;缓冲液体系20mmol/LTris（Tris∶HCl=1∶1.2，浓度比）-60mmol/LSDS-10％甲醇(V/V)，pH=8.6，分离电压15kV，进样时间为30s。并对萃取剂、分散剂、萃取时间、离子强度、pH值等影响萃取效果的因素进行优化。在最优条件下，此方法的富集因子达到369～475倍（峰面积），4种分析物的检出限分别为26.4、23.6、19.4、8.2ng/mL;回收率为90.0％～103.3％，RSD均小于7％。该方法实现了蔬菜中三嗪类除草剂的快速检测，结果令人满意。
　　3.对于大多数分析技术，单次一般只能检测一种农药成分。本实验将在线扫集-胶束毛细管电动色谱法与QuEChERS和分散液液微萃取技术相结合，建立了一种高效的方法用于中草药中四种最常见的不同类型农药的测定。QuEChERS样品处理过程中，用乙腈作萃取剂，伯仲胺(PSA)和石墨化碳黑(GCB)被用来作为样品净化的吸附剂。毛细管均采用未涂层熔融石英管;缓冲液条件为30mmol/L磷酸盐(NaH2PO4∶Na2HPO4=1∶1)-35mmol/LSDS-1.0mol/L尿素-30％甲醇(V/V)，pH=6.9，分离电压-23kV，进样时间为2s。在最佳条件下，4种分析物的检出限分别为80.0、62.0、93.0、70.0ng/mL;回收率在76.8％～97.4％之间，RSD不超过7％。该方法成功实现了中草药中有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类农药的同时测定，结果令人满意。

目录

声明

摘要

主要符号缩写表

1 绪论

1．1 毛细管电泳

1．2 毛细管电泳的基本原理

1．3 毛细管电泳的常用分离模式

1．4 毛细管电泳的进样方法和检测技术

1．5 毛细管电泳中常用的在线富集技术

1．6 毛细管电泳技术在蛋白质和农药残留检测中的应用

1．7 样品前处理技术

1．8 本论文研究的目的和内容

2 在线扫集-胶束毛细管电动色谱法检测血清中的Aβ1-42

2．1 前言

2．2 实验部分

2．3 结果与讨论

2．4 实验总结

3 分散液液微萃取-在线扫集-胶束毛细管电动色谱法用于蔬菜中三嗪类除草剂的快速检测

3．1 前言

3．2 实验部分

3．3 结果与讨论

3．4 小结

4 QuEChERS-分散液液微萃取-胶束毛细管电动色谱法同时检测中草药中多种农药残留

4．1 前言

4．2 实验部分

4．3 结果与讨论

4．4 小结

5 结论与展望

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果

致谢