绞股蓝总皂苷对脑缺血再灌注大鼠脑保护作用的研究

摘要

目的：观察绞股蓝总皂苷(Gypenoside，GP)对血管性痴呆大鼠海马神经元型一氧化氮合酶(neuronalnitricoxidesynthase，nNOS)及核酸的保护作用。 观察GP对全脑缺血再灌注大鼠海马结构、大脑皮层和纹状体韵保护以及海马结构、大脑皮质的即早基因c-jun、c-fos表达的抑制作用。 方法：采用改良的Pulsinelli4-血管阻断(4-VO)方法建立大鼠血管性痴呆模型，用免疫组化法研究GP对大鼠海马nNOS的表达的影响，并用吖啶橙染色法进行GP对血管性痴呆大鼠海马的DNA和RNA保护作用的研究。 采用4-血管阻断(4-VO)方法建立大鼠急性全脑缺血再灌注模型，用吖啶橙染色法观察GP对不同脑区DNA和RNA含量变化的影响；用ABC免疫组化方法观察两种剂量的GP对不同时点、不同脑区JUN、FOS蛋白表达的影响。 结果：与对照组比较，血管性痴呆大鼠海马CA1区和CA3区NOS阳性神经元数目明显减少；而DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度(反映DNA和RNA含量)明显减弱，GP给药组海马各亚区的NOS阳性神经元神经细胞数比VD模型组的明显增多。DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于血管性痴呆模型组，与对照组相似。 与对照组比较，全脑缺血再灌注大鼠各脑区DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度(反映DNA和RNA含量)明显减弱；GP给药组各脑区DNA和RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于全脑缺血再灌注模型组，与对照组相似。 与对照组比较，模型组JUN、FOS蛋白表达最高。各组相同脑区的JUN、FOS蛋白表达随着缺血再灌注时间的延长逐渐减少(再灌注6h＞再灌注24h＞再灌注72h)。再灌注6h各实验组的JUN、FOS蛋白表达结果是：模型组＞GP低剂量给药组＞GP高剂量给药组。 结论：GP可明显增强血管性痴呆大鼠海马NOS阳性神经元的表达，使得NOS神经元形态接近正常、数目增多；DNA、RNA荧光反应强度恢复，接近正常，对DNA和RNA有保护作用。 GP可明显减轻缺血再灌注对大鼠海马、大脑皮层、纹状体及齿状回DNA和RNA损伤。 GP可明显减少缺血再灌注大鼠海马结构、大脑皮层的JUN蛋白和FOS蛋白表达。 缺血再灌注6h、24h、72h的各实验组的大鼠各脑区的JUN、FOS蛋白表达，呈现逐渐减低趋势(再灌注6h＞再灌注24h＞再灌注72h)。 GP对急性全脑缺血模型大鼠的脑损伤的预防保护有一定的剂量相关趋势，GP高剂量给药组保护效果好于GP低剂量给药组，尤其是对再灌注6h这一时点的保护作用效果明显。

目录

摘要

引言

第一部分绞股蓝总皂苷对血管性痴呆大鼠海马CA1、CA3区神经元的保护作用

第二部分绞股蓝总皂苷对全脑缺血再灌注大鼠神经元DNA和RNA的保护作用

第三部分绞股蓝总皂苷对全脑缺血再灌注大鼠脑内c-fos和c-jun基因表达的影响

结论

参考文献

综述绞股蓝基础与临床研究进展

致谢

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