pRb、E2F-1及P21在多发性骨髓瘤骨髓组织中的表达及临床意义

摘要

目的:多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)属于血液系统疾病，是恶性浆细胞病中最常见的一种类型。其特征是由于单克隆的浆细胞恶性增殖，分泌大量单克隆的免疫球蛋白，致使正常的多克隆浆细胞及多克隆免疫球蛋白分泌受到抑制，本周蛋白随尿液排出，并常伴有广泛的骨质破坏，贫血，反复感染，高黏滞综合征，高钙血症，肾功能不全等一系列临床表现，并将引起严重不良后果甚至死亡。近几年来，由于医疗仪器的进步、诊断技术的提高及人口老龄化的增加，多发性骨髓瘤的发病率呈上升趋势。本病的治疗以化疗为主，中位生存期为3-5年，随着蛋白酶体抑制剂等新药的应用，MM的生存期有所延长，但该病的病因及发病机制迄今尚未完全明确，本病目前仍无法根本治愈。因此对多发性骨髓瘤发生、发展机制的研究是十分必要的。
　　真核细胞的增殖分裂是一个精细复杂的调控过程，由细胞周期执行。细胞内存在一系列由调控因子组成的调控系统，细胞周期的有序进行就是在一系列调控因子的保障下完成的，这些调控因子保障了细胞内复杂事件精确有序的进行，保障前一事件准确无误的完成后才启动后一事件的进行。调节细胞周期的机制分为驱动机制和监控机制。驱动机制负责细胞的生长和增殖，主要有细胞周期素、细胞周期依赖性激酶和各种癌蛋白组成;监控机制在DNA受损或细胞接受生长抑制信号时阻止细胞周期的运行，并对受损DNA进行修复，确保DNA复制和有丝分裂的精确完成，主要由细胞周期依赖性激酶抑制剂和抑癌基因组成。细胞周期调控异常与肿瘤发生的关系十分密切，在各种致癌因素的作用下，细胞周期调控因子发生异常，如突变、异位、扩增、缺失等，不能发挥正常功能，致使细胞周期失调，监控机制失活，驱动机制增强，细胞无限制增值，最终形成肿瘤。研究调控因子在细胞周期失调过程中的变化及作用机制，可以为肿瘤的诊断、预后提供新的监控指标并为肿瘤的治疗提供新的靶点。本实验旨在研究细胞周期调控蛋白pRb、E2F-1及P21在MM骨髓活检组织中的表达情况及对MM发生、发展的影响。
　　方法:采用免疫组织化学的方法，测定49例MM病人和15例营养不良性贫血病人骨髓活检中pRb、E2F-1及P21三种蛋白的表达情况。将49例MM骨髓活检标本按照ISS分期标准，分成Ⅰ期组（13例）、Ⅱ期组（14例）和Ⅲ期组（22例），查看三种蛋白在各分期组中的表达情况并分析与MM的关系。依据免疫球蛋白分泌类型不同将MM组分为IgG型（20例）、IgA型（10例）、轻链型（15例）和其它型（4例），观察并分析三种蛋白在不同分型中的表达情况及与MM的关系。根据化疗后的缓解情况将MM组分成完全缓解(CR)组和未缓解（NR）组，CR组28例，NR组21例，观察化疗前后三种蛋白表达情况并分析与MM疗效的关系。
　　结果:
　　1 pRb表达情况:49例MM患者骨髓活检标本中有39例表达阳性，阳性率为79.59％，15例对照组中有7例表达阳性，阳性率为46.67％，两组阳性率表达存在明显差异(P＜0.05)，MM组表达水平高于对照组;两组表达强度存在差异(P＜0.05)，MM组强于对照组。在不同分期中，由Ⅰ期组至Ⅲ期组的阳性表达率为53.85％、78.57％、95.45％,三组阳性率表达存在差异(P＜0.05)，随着MM病理分期的增加pRb的阳性表达率呈增加趋势;三组表达强度存在明显差异(P＜0.05)，由Ⅰ期组至Ⅲ期组呈递增趋势。在不同分型组中，pRb蛋白的阳性表达率无差异(P＞0.05)，表达强度亦无差异(P＞0.05)。治疗前后两组的阳性表达率存在差异(P＜0.05)，NR组高于CR组;治疗后两组表达强度有差异，NR组高于CR组（P＜0.05），而治疗前两组表达强度无差别（P＞0.05）。
　　2 E2F-1表达情况:49例MM组中有39例表达阳性，阳性率为79.60％，15例对照组中5例表达阳性，阳性率为33.33％，两组比较存在明显差异(P＜0.05)，MM组阳性率表达明显高于对照组;表达强度差异有统计学意义(P＜0.05)，MM组高于对照组。由Ⅰ期组至Ⅲ期组的阳性表达率为61.54％、71.43％、95.45％，阳性表达率比较有统计学意义(P＜0.05)，随病理分期增加而增加;三组表达强度存在差异(P＜0.05)，由Ⅰ期组到Ⅲ期组呈递增趋势。在四种不同分型中阳性表达率及表达强度均无差异(P＞0.05)。治疗前两组的表达强度存在差异（P＜0.05），CR组低于NR组，两组阳性表达率无明显差异（P＞0.05）;而治疗后两组的阳性表达率及表达强度存在差异(P＜0.05)，NR组较CR组高。
　　3 P21蛋白表达情况:49例MM组中有29例表达阳性，阳性率为59.18％，15例对照组标本中14例表达阳性，阳性率为93.33％，两组比较存在差异（P＜0.05），MM组低于对照组;两组表达强度存在差异（P＜0.05），MM组低于对照组。由Ⅰ期组至Ⅲ期组的阳性表达率为84.62％、64.29％、40.91％,阳性率表达有统计学意义(P＜0.05)，随着病理分期的增加，P21呈递减趋势;三组表达强度比较差异有统计学意义（P＜0.05），呈递减趋势。在不同分型中P21阳性率和表达强度无明显差异(P＞0.05)。治疗前后两组阳性表达率有统计学意义（P＜0.05），CR组高于NR组;两组的表达强度无差异(P＞0.05)。
　　4相关性分析:pRb与P21蛋白在MM骨髓活检中呈负相关，与E2F-1呈正相关性;P21蛋白与E2F-1呈负相关性。
　　结论:
　　1 pRb在MM中呈高表达，并随MM的病理分期增加呈增加趋势，治疗前后CR组低于NR组，与疾病分型无显著相关。pRb在MM的发生中起促进作用，表达的高低可以反映疾病的进展状态。
　　2 E2F-1蛋白在MM中呈高表达，随病理分期的增加而增加，而与疾病分型无显著相关，经过治疗后E2F-1的表达在CR组低于NR组。E2F-1在MM的发生中起促进作用，可作为评价治疗效果及预后的指标。
　　3 P21蛋白在MM组呈低表达，并随疾病分期的增加呈递减趋势，且治疗前后CR组的表达都高于NR组，但与MM的分型无显著相关性。可见P21可抑制MM的疾病进展，并可反应疾病预后。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

3 结果判断

4 统计学处理

结果

1 pRb在MM骨髓组织中的表达

2 E2F-1蛋白在MM骨髓活检中的表达情况

3 P21在MM骨髓活检中的表达情况

4 pRb、E2F-1蛋白及P21在MM中的关系

附图

附表

讨论

1 pRb在MM骨髓组织中的表达

2 E2F1在MM骨髓活检中的表达

3 P21在MM骨髓活检中的表达

4 pRb、E2F-1及P21在MM骨髓活检中表达的相关性

结论

参考文献

综述 细胞周期失调在恶性肿瘤发生中的作用研究

致谢

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