瘦素在Vogt-小柳原田综合征发病中作用及机制的研究

摘要

本课题的研究主要分为以下三部分： 第一部分 瘦素在Vogt-小柳原田综合征血清中表达的测定 目的:检测VKH综合征活动期、静止期患者及正常人血清中瘦素的表达，初步确定瘦素是否在VKt{综合征中可能的作用。 方法: (1)抽取VKH综合征患者和正常人外周静脉血2ml，静置至凝固，常温分离血清，，-70℃储存备用； (2)采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中瘦素的水平； (3)分别测量VKH综合征患者及正常人的身高体重，在消除体重指数后再分析比较VKH患者与正常对照间的瘦素水平。 结论:瘦素在VKH活动期患者血清中的表达显著高于VKH静止期和正常人，这就提示其可能在VKH综合征的发病中发挥一定的作用，为我们下一步的研究奠定基础。 第二部分 瘦素对VKH患者外周血中单个核细胞增殖的作用 目的:体外实验检测瘦素对VKH综合征患者及正常对照外周血单个核细胞(PBMC)增殖的作用。 方法: (1)采用密度梯度离心法分离VKI-I综合征患者及正常对照的PBMC； (2)不加入或加入不同浓度的重组人瘦素下对VKH综合征患者及正常对照的PBMC培养5天，用3H—TdR掺入法检测在瘦素刺激下人PBMC的增殖率。 结论:瘦素可诱导VKH活动期患者PBMC显著增殖，且呈剂量依赖性，适当剂量的瘦素诱导活动期患者PBMC的增殖显著高于VKH静止期和正常人，这提示瘦素在VKH综合征发病中可能通过促淋巴细胞异常增殖的方式发挥作用。 第三部分 瘦素对VKH患者PBMC细胞因子分泌的作用 目的:体外实验检测瘦素对VKH综合征活动期及静止期患者PBMC细胞因子分泌的作用。 方法: (1)密度梯度离心法分离VKH综合征患者的PBMC，与等量的丝裂霉素处理后的正常人PBMC混合培养，行混合淋巴细胞反应(MLR)，不加入或加入瘦素刺激下培养3天； (2)采用ELISA方法检测上清中IL-17和IFN-γ的水平； 结论:瘦素可诱导VKH活动期患者PBMC促炎症因子IFN-γ和IL-17的表达增高，而在静止期VKH患者中这种促进作用并不明显，这提示瘦素在VKH综合征发病中也可通过促淋巴细胞分泌炎症细胞因子的方式发挥作用。 小结: 本文以VKH活动期、静止期病人和正常对照为研究对象，用ELISA方法检测血清中瘦素水平；分离外周血单个核细胞，在重组人瘦素刺激下培养，用3H-TdR掺入法检测在瘦素刺激下人PBMC的增殖率，并检测培养上清中炎症相关因子IFN-γ和IL-17的水平。研究发现活动期。VKH病人血清中瘦素水平明显高于静止期VKH病人和正常对照，这种差异在用BMI指数消除体重影响后仍表现为有差异。体外培养中，瘦素可明显刺激VKH患者PBMC的增殖，并在混合淋巴细胞反应中刺激PBMC分泌IFN-γ和IL-17。本实验提示瘦素可能与VKH疾病的活动性相关，并通过促进免疫反应在其发病中发挥作用。本研究为进一步探讨葡萄膜炎的作用机制奠定了基础，为临床治疗提供了新的思路。

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文摘

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引言

第一章瘦素在Vogt-小柳原田综合征血清中表达的研究

1.1材料和方法

1.2结果

1.3讨论

第二章瘦素对VKH患者外周血单个核细胞增殖的作用

2.1材料和方法

2.2结果

2.3讨论

第三章瘦素对VKH患者PBMC细胞因子分泌的作用

3.1材料和方法

3.2结果

3.3讨论

全文总结

展望

参考文献

附录

致谢