环氧合酶-2的单核苷酸基因多态性与2型糖尿病患者对牙周炎易感性的研究

摘要

近年来研究显示，慢性炎症可能是产生胰岛素抵抗的重要原因。牙周炎，作为一种常见的慢性炎症，与2型糖尿病的发生发展密切相关。基因背景，可能决定了宿主反应的强弱，从而最终决定疾病的表现形式。依据牙周炎和糖尿病的双向关系，我们推测两种疾病可能有着共同的基因易感因素。本研究初步建立了一个糖尿病和牙周病人群的数据库，首次探讨了环氧合酶-2（COX-2）的三个常见的多态位点与中国人群的重度牙周炎的关系，继而探讨了2型糖尿病患者并发牙周炎，是否也与基因多态性有关。 一、广东地区牙周病及2型糖尿病人群资料库的建立 回顾近年来相关文献，我们发现基因多态性与牙周病病因学研究普遍存在下面的问题：样本量较小；未考虑除基因多态性以外的其他危险因素；大多是包括病例对照研究在内的横断面研究，而缺乏纵向的队列研究或随机对照研究，等。因此，相关的结论有较大争议。一个好的实验设计，严格的纳入，多方面因素的考虑，以及可能的纵向研究，都依赖于一个成熟的数据库。 本章是建立中国广东地区汉族（1）伴有2型糖尿病牙周炎患者，（2）牙周健康的2型糖尿病患者，（3）全身健康的牙周炎患者，（4）健康对照者，调查问卷信息库（包括性别，年龄，身高，体重，职业，学历，医疗保险情况，大体健康情况尤其是糖尿病的病程，血红蛋白，遗传史等，刷牙习惯，吸烟习惯，锻炼习惯，有无定期洁牙，压力状况等），牙周临床数据库（包括指数牙的六个位点的探诊深度，出血指数，牙石指数，根分叉病变等及必要的X线片）和生物样本库（主要是颊粘膜试子，而后期的采样中包括了龈沟液收集，外周血样）。取样时间为2007年8月至2008年5月，样本来自广东省口腔医院，广州医学院第二附属医院，南方医科大学附属珠江医院，顺德明景糖尿病医院，以及广州市内海珠区，白云区，黄埔区等多个社区。本阶段共收集样本总数760例，包括（1）伴有2型糖尿病的牙周炎患者162人，（2）牙周健康的2型糖尿病患者86人，（3）全身健康的牙周炎患者293人，（3）健康对照者219人。为长期开展牙周病病因学研究，分子流行病学研究等积累了工作经验，目前还在进行该数据库的补充和完善。 二、 COX-2基因多态性与中国人群对重度牙周炎的易感性 环氧合酶是将花生四烯酸转化成为前列腺素的关键酶，因此在炎症，肿瘤等疾病过程中发挥了重要作用。目前COX-2的一些基因多态位点被逐渐确认，文献报道了某些功能性位点与疾病具有相关性；但是，COX-2的基因多态性与牙周炎的研究还比较缺乏，2008年为止仅有一篇台湾人群中-765GC（rs20417）的研究。 本章研究了COX-2的三个多态位点：-1195GA（rs689466），-765GC（rs20417）和8473TC（rs5275）与中国人群（广东地区）重度牙周炎易感性的关系。采用病例对照研究方法，根据纳入标准及配对原则，从资料库中选择了146名重度牙周炎症患者及148名健康对照者。PCR-RFLP测定基因型，卡方比较两组间等位基因及基因型分布频率的差异，并采用logistic回归模型分析基因型与牙周炎的相对危险度，以及评价了吸烟，教育，刷牙习惯，经济情况等公认的危险因素对结论的影响。 本研究发现-1195GA位点的等位基因A与重度牙周炎的易感性有显著相关性；-765C与8473C可能是牙周炎的保护因素，但需要进一步验证；三个位点的单倍型-1195A-765G8473T可作为中国人群重度牙周炎的易感标志。在众多的危险因素中，基因型仍然是主要因素。 三、 COX-2基因多态性与2型糖尿病患者对牙周炎的易感性研究 糖尿病一直是牙周炎公认的危险因素，近年的研究显示牙周炎和糖尿病有着密切的双向关系，牙周炎被认作是糖尿病的第六大并发症，两种疾病在病因学上可能有共同因素。 本章继而探讨了-1195GA（rs689466），-765GC（rs20417）和8473TC（rs5275）对2型糖尿病患者来说，是否与牙周炎有易感关系。仍然采用病例对照研究方法，样本总量为392人，并分为四组：T2DM组，2型糖尿病患者，n=46； T2DM+CP组，糖尿病合并牙周炎患者，n=76； CP组，牙周炎患者，n=158；H组，无牙周炎无糖尿病全身健康者，n=112。实验方法和统计方法基本同前章。 我们发现，-1195GA位点的等位基因A的分布频率在T2DM与H组间无差异，但在T2DM+CP组以及CP组与H组比较时有差异。我们认为该位点与牙周炎有相关性，与2型糖尿病无相关，但是与两者并发有关；进而通过分析糖尿病作为牙周炎的一个重要的全身诱导因素，与-1195A的叠加效应，我们发现当糖尿病和GA+AA两个危险因素共同存在时，牙周炎的危险度最大，且差异有显著性。因此，我们初步认为2型糖尿病患者，并具有-1195A等位基因的个体，更容易感染牙周炎。在评价吸烟，教育，BMI，刷牙，经济情况等危险因素后，原有统计学差异丧失，提示我们，尽管-1195A提高了2型糖尿病患者对牙周炎的易感性，但是这是一个多因素共同作用的结果，或者说-1195A的危险性在其他危险因素的作用下加强了。本章未发现-765GC和8473TC位点与糖尿病和牙周炎的相互关系，需要更完善的实验来验证。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章文献回顾

1.1 牙周病的病因

1.2 基因多态性与牙周炎

1.3 牙周病与糖尿病

1.4环氧合酶

第二章广东地区牙周病及2型糖尿病人群资料库的建立

2.1材料和方法

2.2结果

2.3讨论

第三章COX-2基因多态性与中国人群对重度牙周炎易感性的研究

3.1实验方法

3.2结果

3.3讨论

第四章COX-2基因多态性与2型糖尿病患者对牙周炎易感性的研究

4.1实验方法

4.2结果

4.3讨论

全文总结

参考文献

附录

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发表论文

致 谢