当归补血汤及黄芪、当归提取物对动脉粥样硬化大鼠血脂及斑块的影响

摘要

目的：当归补血汤及其组成药物黄芪、当归经过大量的临床研究和实验证明:具有明确的调节血脂及抗动脉粥样硬化的作用。本实验对黄芪、当归单味药进行成分分离提取，将其分离为黄芪多糖、当归多糖、当归挥发油、黄芪水醇提液及当归水醇提液等部分，并以当归补血汤为对照药物，观察当归补血汤及黄芪、当归各提取成分对 VD3注射液＋高脂饮食所诱发的动脉粥样硬化大鼠模型血脂及斑块的影响。通过横向分析各药物组之间的药效学差异，找出当归补血汤发挥调节血脂抗动脉粥样硬化作用的具体有效部位，探讨其调节血脂及抗动脉粥样硬化的物质基础，为进一步优化当归补血汤调节血脂及抗动脉粥样硬化的配伍提供研究基础，也为当归补血汤的最终新药开发提供依据。
　　方法：将黄芪、当归按5：1比例煎制当归补血汤水液，并通过醇提法及水提法对单味黄芪、当归进行分离提取，将其分离为黄芪多糖、当归多糖、当归挥发油、黄芪水醇提液及当归水醇提液等部分。将80只雄性wistar大鼠（体重200-250g），随机分为8组，分别为正常对照组、模型组、黄芪多糖组、当归多糖组、黄芪水醇提液组、当归水醇提液组、当归补血汤组及当归挥发油组。除正常对照组外，其余7组给予VD3注射液灌胃后，高脂饲料喂养，正常对照组等量生理盐水灌胃后普通饲料喂养。6周后乙醚麻醉下，眼眶静脉丛取血，检测血脂四项（TG、TC、HDL-C、LDL-C），并计算动脉硬化指数（AI），检测造模是否成功。确定造模成功后，继续各自喂养方式，除正常对照组及模型组外，各药物组以各自对应药物灌胃进行药物干预，正常对照组及模型组以等量生理盐水灌胃。4周后，乙醚麻醉下，眼眶静脉丛取血，再次检测血脂四项，计算动脉硬化指数，运用SPSS统计软件对各组数据进行分析。断颈法处死动物，剥离主动脉，HE染色后光镜下观察各组主动脉情况，并比较组间差异。
　　结果：⑴VD3注射液+高脂饲料喂养法成功复制动脉粥样硬化大鼠模型。⑵血脂检测结果显示：黄芪水醇提液组TG明显低于模型组（P<0.05），当归挥发油组TG明显高于各组（P<0.05）；黄芪水醇提液组、当归水醇提液组及当归补血汤组TC、LDL-C明显低于模型组（P<0.05），但三组间比较无明显差异（P>0.05），提示黄芪水醇提液对TG的升高存在治疗性，黄芪水醇提液、当归水醇提液、当归补血汤对TC、LDL-C的升高存在治疗性，三组之间比较无明显差异（P>0.05），但其疗效存在一定的趋势，作用强度依次为当归补血汤>黄芪水醇提液>当归水醇提液，当归挥发油组 TC、LDL-C与模型组及其他各药物组相比，明显升高（P<0.05），当归多糖及黄芪多糖组TC、LDL-C与模型组相比有所降低，但无统计学意义（P>0.05）；当归挥发油组HDL-C较模型组明显上升（P<0.05），余药物组对HDL-C变化无统计学意义；黄芪水醇提液及当归补血汤组AI较模型组降低，且具有统计学意义（P<0.05），作用强度为当归补血汤>黄芪水醇提液，当归补血汤与黄芪水醇提液AI差异具有统计学意义（P<0.05），当归挥发油组AI较模型组明显上升，差异具有统计学意义（P<0.05）。⑶主动脉HE染色后光镜下观察示：正常组动脉内膜、中膜和外膜结构完整，层次清晰；模型组出现脂质沉积，泡沫细胞形成，钙盐沉积；当归补血汤组及黄芪水醇提液组基本正常，未见明显泡沫细胞；黄芪多糖组见少量泡沫细胞；当归多糖组出现内膜增生，中膜及内膜见较多泡沫细胞；当归水醇提液组中膜见泡沫细胞，内膜未出现增生；当归挥发油组泡沫细胞融合成片，内膜缺损较严重。
　　结论：黄芪水醇提液能降低 TG，当归补血汤、黄芪水醇提液及当归水醇提液均能降低TC及LDL-C，且疗效存在一定的趋势，作用强度依次为当归补血汤>黄芪水醇提液>当归水醇提液，当归挥发油对TC、TG、HDL-C及LDL-C均具有升高作用。除当归挥发油外，当归补血汤及黄芪、当归各提取成份对As斑块均存在不同程度的治疗作用，推测黄芪水醇提液及当归水醇提液中成分为当归补血汤脂质调节主要物质基础；黄芪水醇提液、当归水醇提液，黄芪多糖及当归多糖为当归补血汤抗As的主要物质基础。但其单个药效不如当归补血汤整体药效，分析在黄芪当归煎煮过程中产生的化学反应，可能促进某些有效成份的释放或产生新的有效物质，从而提高药效。

目录

声明

引言

第一部分 文献研究

一．动脉粥样硬化的研究概况

（一）动脉粥样硬化的概念及其病变特点

（二）动粥样硬化的发病机制

（三）动脉粥样硬化的西医治疗

（四） 动脉粥样硬化的中医病因病机

（五） 动脉粥样硬化的中医药治疗

（一） 当归补血汤源流、组方原理及应用

（二） 当归补血汤药理研究

（三） 当归补血汤益气补血物质基础研究

（四） 当归补血汤应用于动脉粥样硬化的中医理论基础

（五）当归补血汤及黄芪、当归调节血脂及抗动脉粥样硬化研究现状

第二部分 实验研究

一．技术路线图

二．实验部分

（一） 当归补血汤水煎的制备及黄芪、当归部位的提取

（二） 动脉粥样硬化大鼠模型复制

（三） 当归补血汤及黄芪、当归提取物体内药效学实验

第三部分 讨论

一．动脉粥样硬化模型复制

二．当归补血汤应用于动脉粥样硬化治疗中医理论分析

三．当归补血汤及黄芪、当归调节血脂抗动脉粥样硬化具体作用部位及机制探讨

第四部分 存在问题及展望

一．存在问题

（一） 实验过程中未设立高中低剂量组：

（二） 对提取部位未曾进一步明确：

（三）对当归补血汤煎剂的提取：

二．展望

结语

参考文献

附录

致谢